低温水凝胶固定酶制备有机相生物传感器 .pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN1118376A

(43)申请公布日1996.03.13

(21)申请号C6

(22)申请日1994.09.06

(71)申请人中国科学院长春应用化学研究所

地址130022吉林省长春市斯大林大街109号

(72)发明人董绍俊郭奕柱

(74)专利代理机构中国科学院长春专利事务所

代理人曹桂珍

(51)Int.CI

C12N11/04

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

低温水凝胶固定酶制备有机相生物

传感器

(57)摘要

本发明属于低温水凝胶固定酶制备

有机相生物传感器。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

权利要求说明书

一种低温水凝胶固定酶制备有机相生物传感器的方法，其特征是采用可溶性纤维素

0.1％～10％与聚乙烯醇5～25％的混合水溶液，在-4～-10℃冷冻处理10～20小时，

制备出低温水凝胶；制备生物传感器时，将酶，包括过氧化物酶、胆固醇氧化酶、

酪氨酸氧化酶、醇氧化酶、醇脱氢酶、漆酶、乳酸脱氢酶、甘油脱氢酶、胆碱脂酶、

脂肪酶、磷酸脂酶，也可以将媒介体，如铁氰化钾、二茂铁及其衍生物、醌类、有

机染料等与可溶性纤维素和聚乙烯醇的混合水溶液混合均匀，直接冷冻成膜，然后

将膜固定到基底电极上；也可以将该混合物滴涂到基底电极表面，然后冷冻。

说明书

本发明属于低温水凝胶固定酶制备有机相生物传感器的方法。

有机相生物传感器(尤其是酶电极)在有机合成、生物工程、环境监测、医药分析等

领域有着广泛的应用前景。1988年，Hall等人首次报道了有机相酶电极[G.F.Hall，

D.J.BestandA.P.F.Turner，EnzymeMicrob.Technol.，10(1988)543]。从那时至今，

报道了不少种类的有机相酶电极，但都是采用吸附法固定酶(这种酶容易脱附，电

极寿命短)。而且在有机溶剂中必须加入一定量的水，以保证酶的催化活性。例如，

F.Schurbert等报道的测定有机相过氧化氢的辣根过氧化物酶电极[F.Schurbert，

S.Saini，A.P.F.Turner，Anal.Chim.Acta，245(1991)133]，其电极性能为：达到平衡

时间1～1.5小时；响应时间2～5分钟；稳定寿命；两周内灵敏度降低60％；适应

溶剂为事先用5～20％水溶液饱和了的氯仿、氯苯、二恶烷。

南部昌生等人首次用反复冷冻-融溶法及真空冷冻法得到了较高强度高含水的聚乙

烯醇弹性体(制备时，先在-20～-30℃冷冻及室温解冻200小时；然后在-50℃冷冻

5小时)，并用作包扎、冷冻、生物材料固定等材料[南部昌生，高分子加工(日本)，

32(1983)523；Masao，Nambu，Eur，Pat.Appl，EP58，497]。

本发明的目的是将可溶性纤维素与聚乙烯醇的混合水溶液在-4～-10℃冷冻处理，

制备出低温水凝胶。制备有机相生物传感器时，将酶、媒介体与纤维素和聚乙烯醇

的混合水溶液混合均匀后冷冻成膜。制备出的生物传感器达到平衡时间短、响应快、

使用寿命长。

本发明将可溶性纤维素0.1～10％与聚乙烯醇5～25％的混合水溶液在-4～-10℃冷

冻处理10～20小时，制备出低温水凝胶；制备生物传感器时，将酶，包括过氧化

物酶、胆固醇氧化酶、酪氨酸氧化酶、醇氧化酶、醇脱氢酶、漆酶、乳酸脱氢酶、

甘油脱氢酶、胆碱脂酶、脂肪酶、磷酸脂酶，也可以将媒介体，如铁氰化钾、二茂

铁及其衍生物、醌类、有机染料等与纤维素和聚乙烯醇的混合水溶液混合均匀，直

接冷冻成膜，然后将膜固定到基底电极上；也可以将该混合物滴涂到基底电极表面，

然后冷冻。这类传感器可以干燥存放或浸泡存放，可以冷冻存放或室温存放。该生