真核生物转录表达调控.ppt

原核和真核基因表达调控的区别原核生物的机体能在基因表达过程的任何阶段进行调控，如调控可在转录阶段、转录后加工阶段和翻译阶段进行。转录的调控主要发生在起始阶段，通常不在转录延伸阶段进行调控，但可在终止阶段进行调控，终止可以防止越过终止子而进行下一个基因的转录。初级转录产物转变为成熟分子的加工能力可决定最后mRNA分子的组成和功能。在细菌中，mRNA只要一合成，就可用于翻译。翻译也像转录一样，在起始阶段和终止阶段进行调控。DNA转录的起始和RNA翻译的起始路线也很相似。第93页,共93页，星期六，2024年，6月DNA甲基化与X染色体失活第61页,共93页，星期六，2024年，6月Xic和Xist第62页,共93页，星期六，2024年，6月*3，组蛋白乙酰化一般情况下,组蛋白的乙酰化有利于DNA与组蛋白八聚体的解离，核小体结构松弛，从而使各种转录因子和协同转录因子能与DNA结合位点特异性结合，激活基因的转录。第63页,共93页，星期六，2024年，6月在细胞核内，组蛋白乙酰化与组蛋白去乙酰化过程处于动态平衡，并由组蛋白乙酰化转酶（histoneacetyltransferase,HAT）和组蛋白去乙酰化酶（histonedeacetylase,HDAC）共同调控。HAT将乙酰辅酶A的乙酰基转移到组蛋白氨基末端特定的赖氨酸残基上。HDAC使组蛋白去乙酰化，与带负电荷的DNA紧密结合，染色质致密卷曲，基因的转录受到抑制。第64页,共93页，星期六，2024年，6月组蛋白乙酰基转移酶

（Histoneacetyltransferase,HAT）I类：与转录有关转录激活因子本身还有HAT活性中心TAFII250（H3,H4）转录因子TFIID复合物的亚基，协助起始转录p300/CBP（H2A,H2B,H3,H4）共激活因子，跟增强子结合蛋白相互作用，转录激活子II类：与核小体组装和染色体结构有关第65页,共93页，星期六，2024年，6月去乙酰化酶HDAC使组蛋白去乙酰化，与带负电荷的DNA紧密结合，染色质致密卷曲，基因的转录受到抑制。第66页,共93页，星期六，2024年，6月组蛋白乙酰化增强与去乙酰化抑制基因表达的机制乙酰化中和了组蛋白尾巴的正电荷，降低了它与DNA的亲和性和结合能力，最终影响核小体的浓缩水平和可接近性增加，使核小体变得松散，转录因子更容易与基因组的这一部分接触，有利于提高转录水平；第67页,共93页，星期六，2024年，6月*RNA干扰(RNAi)定义：双链RNA诱发的、同源mRNA高效特异性降解的技术。可以特异性降低或关闭目的基因的表达，该技术被广泛应用于基因功能的探索和疾病基因的治疗。机制：特异性地降解靶mRNA（清除错误mRNA）异染色质和转座子区产生的siRNA，通过RNA-蛋白质，蛋白质-蛋白质相互作用募集甲基转移酶到相应位置，导致异染色质话或者基因沉默；进而阻止有害基因表达第68页,共93页，星期六，2024年，6月SiRNA1998年，安德鲁·法厄（AndrewZ.Fire）等在秀丽隐杆线虫（C.elegans）中进行反义RNA抑制实验时发现，作为对照加入的双链RNA相比正义或反义RNA显示出了更强的抑制效果。并且将这种现象命名为RNA干扰。2006年，安德鲁·法厄与克雷格·梅洛（CraigC.Mello）由于在RNAi机制研究中的贡献获得诺贝尔生理及医学奖。21核苷酸的双链RNA，其中19个互补配对，3’端2个不配对，5‘端为磷酸基团；引导链介导靶mRNA的降解，乘客链在siRNA包装成熟后被降解。病毒RNA，或者环境，人为导入的外源RNA都是siRNA的来源。第69页,共93页，星期六，2024年，6月SiRNA的生物合成1）Dicer切割成双链小片段2）组装复合物3）形成活性的沉默复合物（RISC）组装到Ago蛋白中第70页,共93页，星期六，2024年，6月*Dicer20nt左右第71页,共93页，星期六，2024年，6月ArgonauteRnaseH催化RNA的剪切第72页,共93页，星期六，2024年，6月基因沉默的生物学意义转录水平和转录后水平参与基因调控维护基因组的稳定性，保护基因组免受外源核酸侵入（细胞RDRP利用入侵RNA为模版，合成双链RNA经过Dicer切割组装成有活性的RISC，抑制外源RNA对宿主的破坏）第73页,共93页，星期六，2024年，6月miRNA长度为22nt左右的5′端带磷酸基团、3′端带羟基的非蛋白编码的调控小RNA家族