LAS AF简易操作手册.pdf

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LASAF简易操作手册

1启动pyi6o008显微镜的控制箱,EL6000荧光光源,待硬件启动之后,打下

ca宇和

Z待软件启动之后,进入软件兴而,

3、点击AcquireAcquisition,

Image:可下、名人各人

ro的的Gain。明场上为1,英光模式下可增

EMGain:Ca记了加,以不增加背景为宜;

ionsyee[intensity:以制光晶,明场下为1或2,

荧光上为5;

Acquiresetup变换物镜,物镜信息会在此界面显示,

Acquireexperiment采集的图像会暂时存在此处;

Acquirelightpath光路显示,可以在这变换观察方法比如BF《明场)FLUO

〈蒙光),变换滤块如A(DAPI)、I3(GFP)、N2.1(red)等

4、首先找到样品,点击Live,调节焦此,找到清楚的像,调节虽光时间、gain

值,或是光强使图片的亮度适中;

5、点击captureimage采集图像,此时图片会午时存在experiment中:

6、选择多通道采集,

点击+、一增加或减少通道,分别设定每个通道的观察方法、品光时间等参

数后,点击captureimage采集网像;

7、保存图片或实验结果:点击experiment,左键选中要保存的图片或实验,右

键选择saveexperimentas,保存为.放文件《此文件中包含所有信息,如网片

和定量信息),若不进行定量分析,可以直接右键,exportimage,保存为计

文件。

8、添加标尺;aa在图片上拉动合适的长度;

9、保存标尺,导出图片是色选图beseedmoatons

10、保存overlay图片,勾选图人

RS和加

11、”定量分析:选择,选择全攻,区域定量,选择左侧同形,

在图片上勾画出要定量的区域,在和1全豆示灰阶值信息.

点击report可以输出报告。

定量要求:如果是两个通道的荧光比较,这两个通道的曝光时间、增荔、光

强等其它参数要一致,才可以比较灰阶值强度。

注意:

1、”如果定量分析,需要保存为.f文件,若不定量,只导出图片即可:

Z如果使用调焦旋钮无论如何不能找到清晰的图像,可以调节物镜上

的校正环《〈此轮状)进行调节,找到清晰图像为止,

3、关机,要先关软件,再关硬件;

4、”如果不使用荧光,可以不开EL65000,

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