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特异性IgE试验:过敏反应诊断和治疗的客观实验依据
作者:LeeRChoo-Kang,MD
2岁半的玛丽因持续咳嗽去儿科就诊。时值2月,父母说玛丽经常性地流鼻涕、鼻充血、咳嗽已有4
个月。玛丽是足月妊娠、无并发症。1岁时除湿疹外外表看上去很健康,后来湿疹已缓解。自去年冬天进
入日托幼儿园后有一阶段患支气管炎,但整个夏天很好。检查时玛丽有流鼻涕、鼻甲肿胀,双侧肺部有哮
鸣音。玛丽母亲说她本人服用治疗过敏性鼻炎的非处方药,因而怀疑女儿是否也有类似情况。
由于哮喘和特应性疾病的增加,初级保健临床医师正在接诊更多有变应原的年轻呼吸系统疾病患者。
IgE介导疾病的临床表现与年龄有关,湿疹和胃肠道症状是婴儿和儿童继发于食物过敏反应后的第一个临
床表现。当患特应性疾病的儿童长大时他/她更有可能出现经常反复性的慢性呼吸道疾病。幼年就对食物过
敏的儿童随着年龄的增长可演变为对气源性致敏原过敏,与其他儿童相比,他们具有发生哮喘的高度危险。
没有客观的诊断检测方法,仅根据症状、家族史和物理检查来区分有无过敏性疾病是非常困难的。一项研
究表明,不借助试验诊断手段,专家预测过敏性疾病的能力很少能超过50%。
特异性IgE试验的进展
两种类型的试验(体内皮肤刺痕试验和体外血液试验)已经被用以确定疑似变态反应患者体内特异性
IgE抗体的存在。IgE抗体是由免疫系统针对抗原产生的一种特异性免疫球蛋白。一旦特异性B淋巴细胞分
泌的IgE至血流后,就会与身体上皮表面如呼吸道、胃肠道和皮肤上的肥大细胞和嗜碱粒细胞表面膜相接
触。当再接触时,一些过敏原与膜上的相关特异性IgE交联、激发一些包括组胺、白三烯、前列腺素和蛋
白酶在内的炎症介质的释放,从而产生过敏反应的症状。
上世纪70年代引入放射性过敏原吸附试验(RAST)血液检查前,确定IgE介导疾病的唯一方法是皮
肤划痕试验。该试验是使小滴过敏原与皮肤细胞发生反应,同时采用了阳性(组胺)和阴性(盐水)对照。
过敏患者在15分钟内有发红的丘疹反应,皮试结果用数字或丘疹直径来表示。由于皮肤刺痕试验取决于IgE
抗体、免疫细胞和皮肤之间的相互复杂作用,因而患者必须在试验前停止服用抗组胺和三环抗抑郁药(有
抗组胺作用)7-14天。由于皮试后有小量但可能过敏的危险,患者最好不服用β激动剂或单胺氧化酶抑
制剂。皮试对孕妇和不稳定哮喘患者属禁忌症。皮试通常由变态反应科医师进行,要求操作者需经过培训、
有专门的材料和能处理严重的副作用。实验室人员除了准备用于皮试或免疫治疗的抗原外极少进行皮肤刺
痕试验。血液学试验技术的出现使特异性IgE评估得以进入医学实验室。
第一代RAST试验因产生了大量假阴性结果因而被变态反应专家和初级保健医师认为不可靠。这种情
况再加之皮肤试验的高敏感性强化了皮肤试验是特异性IgE检测的金标准这一共识。上世纪70年代末引入
了改良后的RAST试验,目前一些实验室仍在应用这一试验。由于降低了界限值(cutoffvalues),每次试
验所用的样品量也成倍增加,加之血清孵育时间由3小时改为过夜,因而增加了该试验的敏感性。但遗憾
的是,这样一来假阳性的可能性也随之增加,且检测结果大多为定性。80年代后期至90年代初引入的第3
代测定方法由于采用了自动化与单克隆抗体,因而大大增加了检测的敏感性和重复性。第3代试验直接采
用了WHO的IgE参考标准物作为IgE标准品,达到了真正定量检测IgE的目的。
血液试验技术
特异性IgE测定的差异在于抗原结合能力、来源、质量和有效性、试剂的稳定性以及自动化程度。实
验室首先会将患者血清样品与结合在液相或固相载体上的过敏原一起孵育。早期RAST试验采用纸片作为
载体,后来采用纤维素海绵、聚苯乙烯或液相载体以提高结合能力。今天最常用的方法采用的是专利的高
能量反应容器,它包含了一个过敏原包被的多孔纤维素海绵,可以大大增加特异性IgE可以利用的表面积。
IgE与结合的过敏原相互作用形成特异性抗体抗原复合物。过敏原用牢固的共价化学键附着于海绵,因而
可以耐受为去除非特异IgE所采取的不断洗涤过程。洗涤后加入标记的抗IgE单克隆抗体,形成抗IgE抗
体-抗体-过敏原复合物。最后洗去未结合的抗IgE抗体,检测留下的复合物。早期检测这些复合物的特
异性IgE方法学采用的是放射标记,现在已用酶(荧光、比色)或化学发光标
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