临床检验肝素、乙二胺四乙酸盐、枸橼酸盐、草酸盐等抗凝剂抗凝机制及注意事项.doc

临床检验肝素、乙二胺四乙酸盐、枸橼酸盐、草酸盐等抗凝剂抗凝机制及注意事项

抗凝管是为防止血液凝固，经过抗凝处理过的试管。不同颜色抗凝管含有不同的抗凝剂，代表不同的用途。实验室中常用的抗凝剂有肝素、乙二胺四乙酸盐（EDTA盐）、枸橼酸盐、草酸盐等4种。

肝素

肝素广泛存在于肺、肝、脾等几乎所有组织和血管周围肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒中。它是一种含硫酸基团的黏多糖，平均分子量为15000(2000-40000)。

1、抗凝机制

肝素是血液化学成分测定中最好的抗凝剂。其抗凝机制是与抗凝酶Ⅱ一起，在低浓度下抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之间的作用，并能加强抗凝血酶Ⅲ灭活丝氨酸蛋白酶，从而阻止凝血酶形成；还有抑制凝血酶的自我催化及抑制因子X的作用。

2、临床应用

肝素的盐类有钠、锂、铵盐。通常用肝素抗凝的剂量是10.0~12.5IU/mL血液。临床常用肝素锂，虽其价格较贵，但抗凝效果较好。

肝素对血液成分干扰较少，不影响红细胞体积，不引起溶血，适用于做红细胞渗透性试验、血气、血浆渗透量、红细胞压积及普通生化测定。

注意事项

肝素具有抗凝血酶作用，不适合做血凝试验。

肝素过量可引起白细胞聚集和血小板减少，所以不适合做白细胞分类和血小板计数，更不能用于止血检验。

肝素抗凝血不能用于制作血涂片，因为Wright染色后出现深蓝色背景，影响显微镜减产。

肝素抗凝血应于短时间内使用，否则放置过久血液又可凝固。

EDTA

乙二胺四乙酸(EDTA)有二钠、二钾和三钾盐。EDTA盐对红、白细胞形态影响很小，血细胞计数用EDTA二钾作抗凝剂。

抗凝机制??

EDTA是临检工作中最常用和最重要的抗凝剂和试剂之一，其机制是通过与水相中的钙离子形成稳定的螯合物而阻止血液凝固。

2、临床应用

EDTA抗凝剂不影响白细胞计数及大小，对红细胞形态影响最小，并且可以抑制血小板的聚集，适用于一般血液学检测。但如果抗凝剂浓度过高，渗透压上升，会造成细胞皱缩。

EDTA的盐类有钾、钠、锂盐，均溶于水，钾盐较钠盐的溶解度大，全血细胞计数最好使用EDTA的钾盐。

3、注意事项

EDTA-K2可使Ca2+、Mg2+下降，同时使肌酸激酶、碱性磷酸酶降低。EDTA-K2的最佳浓度为1.5mg/ml血液。如果血少，中性粒细胞会肿胀分叶消失，血小板会肿胀、崩解，产生正常血小板的碎片，使分析结果产生错误。

EDTA能影响某些酶的活性和抑制红斑狼疮因子，故不适于制作组化染色和检查红斑狼疮细胞的血涂片。

EDTA还会影响血小板聚集和白细胞吞噬功能，也不适于做止血学检验和血小板功能检验。

枸橼酸盐

枸橼酸盐可与血中钙离子形成可溶性螯合物，从而阻止血液凝固。

有Na3C6H5O7·2H2O和Na3C6H5O7·5·5H2O等多种晶体。通常用前者配成109mmol/l(32g/l)水溶液(也有用106mmol/l浓度)，与血液按1:9或1:4比例使用。

1、抗凝机制

枸橼酸盐主要是枸橼酸钠，其抗凝原理是能与血液中的Ca2+结合形成螯合物，使Ca2+失去凝血功能，凝血过程被阻断，从而阻止血液凝固。

临床应用

枸橼酸钠与血液按1:9使用。

大部分凝血试验都可用枸橼酸钠抗凝，它有助于Ⅴ因子和Ⅷ因子的稳定，并且对平均血小板体积及其他凝血因子影响较小，可用于血小板功能分析。

枸橼酸钠细胞毒性较小，也是输血中血液保养液的成分之一。

3、注意事项

枸橼酸钠6mg才能抗凝1ml血液，碱性强，不适用于血液化验和生化测验。

对于用于监测口服华法林等抗凝剂治疗的患者，测定PT、APTT所用的枸橼酸钠浓度不应随意改变，因为可能影响到国际标准化比值(INR)。

草酸盐

草酸盐也是常用的抗凝剂，优点是溶解度大。

常用的草酸盐抗凝剂种类有草酸钠、草酸钾和草酸铵，草酸钠的常用浓度为0.1mol/L，与血液按1:9比例使用。

1、抗凝机制

草酸盐溶解后解离的草酸根与标本中的Ca2+形成草酸钙沉淀，使Ca2+失去凝血功能，凝血过程被阻断。??

2、临床应用

可用于血液生化测定。

高浓度k+或Na+易使血细胞脱水皱缩，而草酸铵则可使血细胞膨胀，故测定血细胞比容时用草酸铵与草酸钾或草酸钠两者适当比例混合的抗凝剂，恰好不影响红细胞的形态和体积。??

3、注意事项

不适用于K+、Ca2+的测定。由于生成草酸钙沉淀，红细胞会出现锯齿状，白细胞出现空泡，淋巴细