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乳酸茵包埋方法的研究

袁秀丽，吕嘉枥，李旭华

(陕西科技大学生命科学与工程学院，陕西西安，710021)

摘要为了研制高活性的乳酸菌载体颗粒，以保加利亚乳杆菌为研究对象，分别以琼脂和海藻酸钠为菌体包

埋材料，通过菌体包埋、载体制备和载体培养等方面条件研究，结果表明：海藻酸钠包埋菌体效果优于琼脂，其载

体的最佳培养条件为：1％海藻酸钠，用1％CaC1固化；将载体置于含l％CaCO，的培养基中，41℃、培养20h左

右时，载体中活菌数可高达2．2×10“CFU／g。

关键词乳酸菌，保加利亚乳杆菌，载体，包埋

乳酸菌作为益生菌中颇具代表的菌群，其产品中胨、柠檬酸氢二铵(天富精细化工有限公司)，

乳酸菌的数量及活力是衡量该类产品质量优劣的重K：HPO、乙酸钠、吐温80、CaCO、CaC1：、海藻酸钠、

要指标之一。如何制备高菌数、高活性的乳酸菌产品柠檬酸钠(西安中信精细化工有限公司)等。

已成为目前研究的重点与难点。目前常用的浓集乳1．2仪器与设备

酸细菌的方法¨是高密度培养法和分离法，但这2超净工作台，苏净集团安泰公司；PB一10酸度

种方法存在操作复杂，需要借助昂贵的仪器设备等问计，北京赛多利斯天平有限公司；Ls—c50L型立式压

题，限制了在工业化生产乳酸菌时的推广应用。采用力蒸汽灭菌锅，江阴滨江医疗设备厂；显微摄影系统，

高密度培养乳酸菌，在国内外均有报道，目前主要有重庆奥特光学仪器有限公司。

化学中和法、缓冲盐法、透析培养、膜过滤培养、微胶1．3试验方法

囊培养法。微胶囊培养法是一种新的培养方法，该法1．3．1工艺流程

在对乳酸菌进行培养时将乳酸菌固定，由于营养物质琼脂、海藻酸钠一灭菌一与茵液混合一造粒一固

和代谢产物可以自由地通过微胶囊，同时又减少了培化一载体一无菌水冲洗一培养载体一取出载体一释放

养过程中对细胞的损伤和损失，克服了传统游离细胞1．3．2检测与分析方法

悬浮培养的缺点和限制，可以获得较大的菌体密度。(1)包埋载体机械强度的检测：取20个均匀的

本研究借助包埋的方法使乳酸细菌浓集在海藻酸钙载体颗粒，用50g的砝码加压，观察包埋颗粒的外

凝胶载体中生长繁殖，此方法简便，对设备的要求低，形，若无变化，为优；若有裂痕但是外形基本不变，为

可为制备高活性乳酸细菌产品的工业化生产提供理中；若外形完全被破坏，为差。

论依据。(2)包埋载体平均直径的测量：取20个载体颗

粒，测其总长后计算出平均值为载体直径。

1材料与方法

(3)pH值测定：直接用PB—l0酸度计测定。

1．1材料与试剂(4)海藻酸钙载体载体中菌体释放及活菌数的

1．1．1供试菌种测定：将载体中的菌体定向释放，再按改进的高层

德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdel—琼脂柱法进行计数。

brueckiisubsp．bulgaricus，L．B．)，由陕西科技大学生

2结果与讨论

命科学与工程学院微生物教研室提供。

1．1．2试剂与药品