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01基因工程试题练
1.新型冠状病毒在世界范围内传播已有一段时间,各国在防止病毒传播、扩散的同时,都在努力加快疫苗研发进度;到目前为止,已有部分疫苗进入临床使用阶段。下图是部分疫苗制备的流程,结合下图回答有关问题。
(1)若制备腺病毒载体新冠病毒疫苗,首先需要在_________作用下,以新冠病毒的遗传物质RNA为模板经过逆转录获得DNA;此外,还需要______________酶参与,才能制备重组的腺病毒,该步骤在基因工程中被称为____________。
(2)此方法使用的是有遗传缺陷(不会整合到宿主细胞染色体的DNA上)的腺病毒,这种重组腺病毒疫苗必需具备的条件除将新冠病毒抗原基因(目的基因)导入受体细胞内之外,还有________________________(写出一点即可)。
(3)无论体内技术还是体外技术得到的疫苗,注射到人体内,均可使人体产生特异性免疫反应,产生相应抗体和______________,而起到免疫预防作用。新冠疫苗制备后,经过一段时间后,可能会起不到良好的预防作用,原因是_____________________________
2.下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程,①—④表示相关的操作,EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶,它们的识别序列及切割位点如表所示。回答下列问题:
(1)上述过程中,需将目的基因插入到Ti质粒的___________片段上才能整合到人参细胞的__________上,检测目的基因是否导入人参愈伤组织细胞的方法是___________。
(2)步骤①中,利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是_________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了___________和___________序列,以便于后续的剪切和连接,PCR过程中要用到_________酶,至少需复制____次才可以获得____个单独的目的基因。
(3)过程②所构建的基因表达载体中启动子的作用是___________,过程③中需先用___________处理根瘤农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(4)和用一种限制酶切割质粒和目的基因相比,用EcoRⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割的优点是______。
3.普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因,控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶,该酶能破坏细胞壁,使番茄软化,不耐贮藏。科学家将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞,培育出了抗软化、保鲜时间长的转基因番茄。图1为操作流程图,KmR为卡那霉素抗性基因PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ为四种限制酶切割位点,据图回答问题。
(1)本实验中的目的基因为_____________,使用___________技术获取大量的该基因。在构建重组质粒过程中,为了确保目的基因和质粒定向连接,需要使用的限制酶有____________。
(2)将获得的重组质粒利用__________导入到普通番茄细胞中,为筛选含有目的基因的番茄细胞,需要在培养基中加入___________。
(3)如果利用上述方法培育出的番茄不具抗软化性状,用____________作探针进行分子杂交技术检测,发现细胞内有目的基因存在,但检测不到mRNA1分子,可能原因是目的基因上游缺少______。
(4)根据图中转基因番茄细胞中的信息表达过程,分析转基因番茄抗软化的原理____。
4.将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。
表1引物对序列表
引物对A
引物对B
表2几种限制酶识别序列及切割位点表
限制酶
AluI
EcoRI
PstI
SmaI
切割位点
请根据以上图表回答下列问题。
(1)图1中获取目的基因(抗原基因)是用_____方法,使用该方法获取目的基因的关键在于______。
(2)从上图可知,引物应该与___配对结合,故引物对设计注意事项之一是___,______需要较高的退火温度。
(3)为将外源基因转入马铃薯,图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为______,目的基因应该插在细菌B质粒的__上。
(4)对符合设计要求的重组质粒T进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开,请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列,对以下酶切结果作出判断。
①采用PstI和EcoRⅠ酶切,得到______种不同于质粒T的片段的DNA片断。
②采用EcoRⅠ和AluI酶切,得到______种不同于质粒T的片段的DNA片断。
(5)目的基因表达载体成功导入受体细胞后一般使用______技术得到转基因植株。
5.四尾栅藻生长周期短、适应性强,是一种高潜力生物柴油新型原料,但油脂产量低。研究人员从含油量高的紫苏中提取DGA
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