微生物学检验技术 课件 23项目二十三：非发酵菌鉴定.pptx

项目二十三非发酵菌鉴定

学习目标1．掌握铜绿假单胞菌的主要生物学特性、微生物学检验方法及鉴定依据。2．熟悉不动杆菌属和产碱杆菌属主要生物学特性、微生物学检验方法及鉴定依据。3．了解常见非发酵革兰阴性杆菌的临床意义。4．具有正确采集和处理常见非发酵革兰阴性杆菌检验标本及进行相关检测的能力。5．能正确选择试验项目对常见非发酵革兰阴性杆菌进行检验，能正确判断和分析试验结果并发出检验报告。项目二十三非发酵菌鉴定

思维导图项目二十三非发酵菌鉴定

一、假单胞菌属的鉴定项目二十三非发酵菌鉴定

一、假单胞菌属的鉴定概述1.假单胞菌属（Pseudomonas）为严格需氧、有鞭毛、无芽胞、无荚膜的革兰阴性杆菌，氧化酶试验均阳性，是假单胞菌科的代表菌属，包括200多个菌种。2.假单胞菌属是一类无芽胞、散在排列的革兰阴性杆菌，菌体直或微弯，有单鞭毛或丛鞭毛，运动活泼，专性需氧。3.与人类关系密切的有铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、产碱假单胞菌等，是医院感染的主要病原菌。

1.生物学性状（1）形态与染色：革兰阴性细长杆菌，有荚膜，单鞭毛，运动活泼一、假单胞菌属的鉴定（一）铜绿假单胞菌

1.生物学性状（2）培养特性：营养要求不高，专性需氧，4℃不生长，42℃可生长。普通培养基上生长，80～90％产生各种水溶性色素，如绿脓素和荧光素。一、假单胞菌属的鉴定（一）铜绿假单胞菌

1.生物学性状（3）生化反应：氧化酶阳性，氧化分解葡萄糖、木糖产酸不产气，液化明胶，还原硝酸盐为亚硝酸盐并产生氮气，吲哚阴性，利用枸橼酸盐，精氨酸双水解酶阳性。一、假单胞菌属的鉴定（一）铜绿假单胞菌

1.生物学性状（4）抗原构造菌体（O）抗原鞭毛（H）抗原外膜蛋白：具有属的特异性脂多糖：具有型特异性一、假单胞菌属的鉴定（一）铜绿假单胞菌

1.生物学性状（5）抵抗力：抵抗力强，对干燥、紫外线有抵抗力，对热抵抗力不强，56℃30min可被杀死，对某些消毒剂敏感，1%石炭酸处理5min即被杀死，临床分离菌株对多种抗生素不敏感一、假单胞菌属的鉴定（一）铜绿假单胞菌

2.临床意义（1）主要致病物质：铜绿假单胞菌有多种致病因子，包括结构成分、毒素和酶，如粘附素、多糖荚膜样物质、内毒素、外毒素A、弹性蛋白酶、磷脂酶C等（2）所致疾病：铜绿假单胞菌是条件致病菌，免疫力低下者易感染，是医院内感染的主要菌之一。临床表现多样，引起化脓性感染，如烧伤感染、呼吸道感染、中耳炎、眼角膜炎等，合并败血症者死亡率高。（3）药物敏感性：对抗假单胞菌青霉素类、氨基糖苷类、环丙沙星、头孢吡肟、头孢他定、美罗培能、亚胺培南敏感。医院获得性铜绿假单胞菌较社区分离株有较高的耐药性，常显示多重耐药。一、假单胞菌属的鉴定（一）铜绿假单胞菌

3.微生物学检验（1）标本采集：根据疾病及检查目的分别采集不同的临床标本，如血液、痰液、脑脊液、胸（腹）水、尿液、脓液、分泌液、粪便等。医院环境检测可从空气、水、物体表面等处采样。一、假单胞菌属的鉴定（一）铜绿假单胞菌

3.微生物学检验（2）检验程序标本增菌分离培养（血平板）最后鉴定可疑菌落（性状、色素）初步鉴定涂片染色镜检血标本涂片镜检氧化酶菌落特征绿脓素气味42℃生长分型生化鉴定：O/FO枸櫞酸盐利用＋精氨酸双水解＋乙酰胺酶＋明胶液化＋一、假单胞菌属的鉴定（一）铜绿假单胞菌

3.微生物学检验（3）检验方法1）直接镜检：涂片、革兰染色2）分离培养：直接接种或增菌后接种血平板和MAC3）鉴定：根据菌落特征、色素、菌体形态、生化反应等作出鉴定。对无色素菌株应与其他假单胞菌鉴别一、假单胞菌属的鉴定（一）铜绿假单胞菌

铜绿假单胞菌与其他假单胞菌的鉴别?铜绿假单胞菌荧光假单胞菌恶臭假单胞菌韦龙氏假单胞菌产碱假单胞菌氧化酶999710010096溴化-16-烷基-3-甲胺生长948987ND156.5%氯化钠生长6543100ND4142℃生长1000000硝酸盐还原9819010054青脓素6596931000精氨酸双水解酶1009710010012尿素水解575275250明胶水解821000130葡萄糖产酸971001001000枸橼酸盐9593100ND65一、假单胞菌属的鉴定（一）铜绿假单胞菌

1.生物学特性（1）形态与染色：为革兰氏阴性杆菌，大小为0.7～0.8μm×2.3～2.8μm，有鞭毛，无芽孢，有数根极生鞭毛。（2）培养特性：需氧，最适生长温度是25～30℃，4℃生长，42℃不生长，在血平板上30℃孵育24h后形成灰白色、扁平稍隆起、湿润、光滑、边缘整齐的菌落，无溶血，挑取菌落呈黏丝状。能分泌黄绿色荧光色素发出荧光一、假单胞菌属的鉴定（二）荧光假单胞菌

2.临床意