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;;任务目标;;5.动物克隆(animalcloning):利用无性繁殖的方式产生一系列遗传物质完全相同动物的过程。
6.胚胎细胞(embryoniccell):胚胎卵裂球细胞或内细胞团细胞。
7.胚胎干细胞(embryonicstemcell):从胚胎内细胞团或原始生殖腺分离出来的能在体外无限增殖且具有全能性的细胞。
8.细胞全能性(celltotipotency):细胞所具有的由一种细胞分化形成生物所有的组织细胞(包括生殖腺在内)的能力。
9.细胞多能性(cellmultipotency):细胞所具有的由一种细胞分化形成两种或两种以上细胞或组织的特性。
(二)利用胚胎分割法克隆动物(Cloninganimalbyembryosplitting)
1.用胚胎分割法克隆动物基本概念(basicconcept):就是利用机械分割的方法将一个胚胎分割为若干等份,使分割的胚胎都能发育成个体的过程。
2、操作程序:
;2.基本程序(basicprogram)
(1)准备切割器具(prepareinstrumentortool):显微操作仪、体视显微镜、倒置显微镜、胚胎固定管和分割针
(2)处理胚胎(dealwithEmbryo):将胚胎用链霉蛋白酶处理,软化透明带。
(3)分割胚胎(splittingEmbryo):用机械切割法(刀,针)将胚胎内细胞团或卵裂球分割为若干部分
(4)移植细胞于透明带内(transferembryoniccellintopellucidzone):将多个卵裂球细胞或内细胞团细胞移植入去胚胎细胞的透明带中。
(5)培养胚胎(cultureembryos):采用受体培养法或体外培养法培养胚胎。受体培养法就是将胚胎放在动物输卵管或子宫角,利用动物体内条件培养胚胎。
(6)移植胚胎(transferembryos):将分割胚胎移植给经同期发情处理的受体动物的子宫角或输卵内。
(7)受体动物妊娠和分娩(Thepregnancyofreceptorandparturition):移植的克隆胚胎在受体动物体内发育,形成克隆动物。;3.胚胎分割法克隆动物研究进展(progressonanimalcloningbysplittingembryo)
(1)1904年,Spemann将蛙的胚胎进行分割,获得了同胚双生后代。
(2)1930年,Pinus将兔子的单个2-细胞卵裂球培养成为体积较小的亚囊胚。
(3)1970年,Mullen分离小鼠2-细胞胚胎卵裂球,获得同卵双生后代。
(4)1978年,Moustafa将小鼠桑椹胚分割,获得同卵双生后代
(5)80年代,Willadsen对绵羊早期胚胎进???分割,获得四分之一、八分之一分割胚胎后代。
(6)1986年,由窦忠英教授完成的我国第一个胚胎分割牛在西北农业大学诞生(四分胚)。
(7)1988年,由张涌教授完成的我国第一个胚胎分割二分胚小鼠在西北农业大学诞生。目前已有猪、马、牛、羊、兔、小鼠、人分割胚后代。;4.胚胎分割克隆动物的意义(Thefunctionofcloninganimal)
(1)提高胚胎利用率,充分发挥母畜繁殖潜力
(2)获得遗传基础同一的个体,为利用后裔评价种畜育种值提供实验材料
(3)为胚胎性别鉴定提供材料。
(4)为转基因胚胎的鉴定提供实验材料
(5)为药物和饲料营养价值的评定提供实验材料,消除遗传因素对实验结果的影响。
5.目前存在的问题(Theproblemofanimalcloningbysplittingembryosatpresent)
(1)初生重低(Lowofbirthweight)
(2)遗传一致性(geneticidentical)
(3)所获克隆动物数量少(afewofcloneanimalbysplittingembryo)
(4)先天性畸形,发育不良;(三)用细胞核移植克隆动物(cloninganimalbycellnucleartransplantation)
1.细胞核移植是指利用显微操作技术将一种动物细胞移入同种或异种动物的去核成熟卵母细胞内,形成核质杂种新细胞。并通过激活,融合,形成胚胎的过程。
2.细胞核移植的意义
(1)大幅度提高良种动物繁殖效率分割或消化早期胚胎进行移植,能克隆多个子代个体;
(2)为外源基因导入细胞(或基因敲除)创造条件;研究基因的功能。
(3)为进一步研究细胞核质关系奠定基础;
(4)加速动物育种进程避免自然条件下选种动物育种周期长和生育效率低的限制。;(5)为动物遗传资源保存提供支撑
1)保存细胞就等于保存个体。
2
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