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海绵体神经损伤勃起功能障碍大鼠模型的建立

目的:建立一种简单、安全、高效、持久的阴茎海绵体神经损伤性勃起功

能障碍大鼠模型。方法:30只8周龄Sprague-Dawley大鼠,随机不均等分为两

组,正常对照组(NC组5只)、海绵体神经损伤组(CN组25只)。无菌手术条

件下经腹腔注射3%戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉成功后,下腹正中切口3cm暴

露前列腺,于前列腺后外侧找到双侧大鼠阴茎海绵体神经行程,并用双极微电极

电刺激诱发勃起确认,同时监测ICP/MAP。CN组以无菌手术钳每侧海绵体神经

间隔1cm双重钳夹30s/次,并于术中再次电刺激证实阴茎海绵体神经损伤。NC

组为假手术组,只暴露海绵体神经而不钳夹损伤。在术后12周进行APO试验,

电刺激下ICP/MAP评估以及处死后阴茎海绵体组织HE染色切片检查,CN组在

手术造模后第1、2、4、8及12周随机选取5只进行电刺激下ICP/MAP评估以

及处死后阴茎海绵体组织HE染色切片检查。结果:NC组ICP/MAP术前、术后

12周分别为(0.630.08±)、(0.60±0.09),术前、术后比较差异无统计学意义

(P0.05)。CN组术前,术后第1、2、4、8及12周电刺激时ICP/MAP分别为

(0.64±0.09)、(0.20±0.03)、(0.21±0.04)、(0.25±0.05)、(0.23±0.04)、(0.24±0.06),

CN组术后ICP/MAP两两比较,差异无统计学意义(P0.05),CN组术前与术

后ICP/MAP比较差异均有统计学意义(P<0.05)。术后12周APO试验NC组

和CN组勃起率分别为100%、0。与NC组比较,CN组HE染色切片结果显示

海绵体纤维化在术后第4~8周最明显。结论:间隔分段序贯钳夹双侧阴茎海绵

体神经是一种方便易行、简单高效、持久稳定的阴茎海绵体神经损伤勃起功能障

碍大鼠模型建模方法。

男性阴茎勃起是在内源性或者外源性刺激诱导下通过神经内分泌的调节,作

用于阴茎海绵体内皮细胞及海绵体血管平滑肌所产生一系列的血流动力学变化

而导致的阴茎海绵体充血增大增粗现象。与阴茎勃起密切相关的外周勃起神经为

阴茎海绵体神经(Cavernousnerve,CN),其为盆腔大神经节(Pelvicmajor

ganglion,MPG)发出混合性神经纤维束,与伴行的血管组成神经血管束

(Neurovascularbundle,NVB)。CN经阴茎脚支配阴茎海绵体前,与盆腔内的直

肠、膀胱及前列腺紧贴。盆腔手术及外伤极易损伤CN,特别在男性盆腔恶性肿

瘤手术根治、放疗、冷冻消融过程中,为了确保癌患清除彻底,CN损伤难以避

免。为进一步研究CN损伤导致ED,则需建立一种稳定长久、简单易行、省时

节约CN损伤性ED动物模型。

1材料与方法

1.1实验动物与分组30只8周龄、体质量250~300g、经性交试验明确有

正常勃起功能的Sprague-Dawley(SD)雄性成年大鼠(由中山大学实验动物中

心提供),随机不等分为两组,假手术组(正常对照组,NC组)5只,海绵体神

经损伤组(实验组,CN组25只)。CN组中大鼠分别于术后1、2、4、8及12

周时间点按照随机原则选取5只SD大鼠进行CN电刺激下测压并颈椎脱臼处死

获取阴茎海绵体组织;NC组大鼠于术后12周再次手术进行CN电刺激下测压后

获取阴茎海绵体组织,所有获取阴茎海绵体组织经石蜡包埋、切片、根据不同染

色后观察组织结构变化。饲养环境为:屏蔽系统、温度25℃、湿度50%、周期

12h光照/12h黑暗、自由获得食物及饮水、通风保持为0.1m/s。

1.2监测ICP/MAP阴茎海绵体内压(Intra-cavernouspressure,ICP)测定:

采用预先充满250IU/mL肝素钠生理盐水溶液带导管22G输液针经阴茎根部穿

刺进入阴茎海绵体内,导管再与压力换能器相连。平均动脉压(Meanartery

pressure,MAP)测定:对同一大鼠行颈部正中切口,仔细分离出左侧颈总动脉,

向心脏方向插入预先充满250IU/mL肝素钠生理盐水溶液带PE50导管,导管连

接压力换能器。使用泰盟BL-42

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