草莓脱毒原原种苗制备技术规程.docxVIP

Q/LB.□XXXXX-XXXX

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ICS

FORMTEXT65.020.20

CCS

FORMTEXTB05??

FORMTEXT14

FORMTEXT山西省地方标准

DBFORMTEXT14/T1591—XXXX

FORMTEXT代替DB14/T1591-2018

FORMTEXT草莓脱毒原原种苗制备技术规程

FORMTEXT?????

FORMDROPDOWN

FORMTEXT?????

FORMDROPDOWN

FORMTEXT2024-XX-XX发布

FORMTEXT2024-XX-XX实施

FORMTEXT山西省市场监督管理局??发布

STYLEREF标准文件_文件编号DB14/T1591—XXXX

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STYLEREF标准文件_文件编号DB14/T1591—XXXX

目次

TOC\o1-1\h\u5967前言 II

312581范围 1

202102规范性引用文件 1

24843术语和定义 1

232334外植体选择 1

71845脱毒与检测 1

208496茎尖初代培养 2

167247组培苗继代扩繁 2

35318组培苗生根诱导 2

121499组培苗驯化移栽 3

25336附录A（资料性）草莓脱毒原原种苗组培生产记录表 4

13787附录B（资料性）草莓脱毒原原种苗出圃登记表 5

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件代替DB14/T1591—2018《草莓脱毒原原种苗制备技术规程》，与DB14/T1591—2018相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：

——更改了病毒检测方法（见5.2）；

——增加了脱毒原原种苗的保存（见9.3.3）。

本文件由山西省农业农村厅提出、组织实施和监督检查。

本文件由山西省市场监督管理局对标准的组织实施情况进行监督检查。

本文件由山西省农业标准化技术委员会（SXS/TC19)归口。

本文件起草单位：山西农业大学。

本文件主要起草人：刘伟、樊新萍、王国平、郭华、史华平、李磊、李志强、程春振、武敏、赵琪、李倩。

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：

——2018年首次发布为DB14/T1591—2018；

——本次为第一次修订。

草莓脱毒原原种苗制备技术规程

范围

本文件规定了草莓脱毒原原种苗制备的术语和定义、外植体的选择、脱毒方法、病毒检测方法、茎尖的初代培养、组培苗的继代扩繁、生根诱导及驯化移栽、原原种苗的保存方式。

本文件适用于草莓脱毒原原种苗的制备。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T3032-2016草莓脱毒种苗生产技术规程

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

草莓脱毒原原种苗

指脱毒的草莓组培苗移栽于无草莓病源、虫源的隔离区内生长的植株。

微茎尖脱毒

从匍匐茎上切取约0.2mm茎尖分生组织接种至培养基中，分化出的组培苗可脱除病毒。

外植体选择

采集时期

外植体宜在结果后期匍匐茎大量抽生阶段进行采集。

选择要求

选取健壮、无病、开花结果正常的草莓植株作为母株，采集刚抽出且叶片未展开的匍匐茎作为外植体材料。

脱毒与检测

脱毒方法

采用微茎尖脱毒法对草莓匍匐茎外植体材料进行脱毒处理。

病毒检测

针对草莓斑驳病毒(Strawberrymottlevirus,SMoV)、草莓轻型黄边病毒(Strawberrymildyellowedgevirus,SMYEV)、草莓镶脉病毒(Strawberryveinbandvirus,SVBV)利用RT-PCR法进行检测，具体操作依据NYT3032-2016的要求执行。

茎尖初代培养

初代培养基的选择

草莓茎尖初代培养的培养基为MS+0.5mg/L~1.0mg/L6-BA，添加蔗糖30g/L，调节培养基pH值至5.8。

外植体消毒方法

切取匍匐茎顶端2cm左右作为外植体进行消毒，流水冲洗0.5h~2h。在超净工作台下，用75%酒精将外植体浸泡30s，再用1.0%次氯酸钠消毒10min~15min或0.1%升汞溶液消毒5min~10min，无菌水冲洗3次~5次。所用消毒液与外植体体积的比例约为10:1。

茎尖分生组织切取

将消毒后