靶向整合素αvβ3新型探针制备及卵巢癌显像和抗瘤血管药效监测研究.pdf

靶向整合素av33新型探针制备及卵巢癌显像和抗瘤血管药效

监测研究

第一部分’8F标记新型RGD二聚体（18F-RGD2探针构建及其在SK0V-3卵巢癌

荷瘤鼠靶向显像中的应用研究研究背景卵巢癌发病率在全球妇科恶性肿瘤中排第二

位,早期症状隐匿,发现时往往处于进展期或者已经扩散。临床研究证据表明卵巢

癌对化疗敏感,治疗上一般采取手术切除后行卡铂或紫杉醇辅助化疗。

而对于丧失手术机会的病人则直接采取化疗疗法。近年来尽管卵巢癌病人5

年生存率有所改善,但死亡率仍居高不下。

大量临床试验研究证实,抗肿瘤血管生成治疗对各个分期的卵巢癌病人的预

后都具有重要影响。近来研究证实,抗肿瘤血管生成治疗联合放化疗,可以明显增

强抗肿瘤疗效,改善预后。

因此,目前临床上急需一种无创性影像学检查方法对肿瘤进行早期检测、监测

抗血管生成治疗疗效以及筛选适合进行抗血管生成治疗的肿瘤患者。近年研究表

明,整合素av33在肿瘤新生血管和某些类型的肿瘤细胞上高表达，而在成熟的血

管和正常组织无表达或者极低表达。

,,

RG多肽是整合素av33的配体可以高亲和力与整合素av33特异性结合

,

因此利用RGD多肽类探针进行整合素av33靶向显像对早期诊断肿瘤和监测抗肿

瘤药物疗效具有重要临床价值。紫杉醇是最重要的一线抗癌药物之一,但是其抗肿

瘤机制迄今为止尚未完全阐明。

目前认为主要包括细胞周期停滞、诱导凋亡、使微管聚集。此外最新研究证

实紫杉醇还有抗肿瘤新生血管生成作用。

本论文合成一种新型18F标记聚乙二醇修饰的RGD探针

18F-FB-NH-PEG4-E[PEG4-c(RGDfK)]2记为18F-RGD2),并研究了其在人卵巢癌

SK0V-3荷瘤鼠模型中靶向肿瘤显像及监测抗血管生成药物疗效的作用及意义。

实验方法1、制备探针18F-RGD2各纯化的18F-SFB溶于DMSO然后添加

NH2-PEG4-E[PEG4-c(RGDfK)]2(RGD的DMSOS液和DIPEA,60C加热30mmin.

产物用Sep-PakC-18柱进行纯化,并应用radio-HPLC检测放化纯。

2、建立荷瘤鼠模型选取4-6周龄的雌性裸鼠，左肩皮下注射含5X106个

SKOV-a卵巢癌细胞的生理盐水溶液，操作在通风的无菌条件下完成，建模后进行常

规饲料喂养。肿瘤大小约50mm3时进行生物学分布研究。

3、生物学分布研究及阻断实验荷瘤鼠尾静脉注射1MBq/0.1ml18F-RGD2,30

min、60min、120min后分批处死小鼠。采集肿瘤、血液、肌肉、骨、心脏、

肝脏、肺、肾脏、肠等重要组织和器官，称重后,用丫计数器进行放射性计数，计

算％ID/g。

阻断实验：另选SKOV-3荷瘤小鼠，每只尾静脉同时注入1MBq/0.1ml剂量的

18F-RGD却过量未标记的E[c(RGDfK)]2,60min后处死小鼠，进行生物学分布研

究。4.MicroPET显像两组SKOV-3荷瘤鼠分别注射3.7MBq/0.1ml18F-RGD2

或者5MBq/0.1ml18F-FDG,60min后,腹腔内注射0.6%戊巴比妥钠,麻醉后行

MicroPET扫描，扫描模式为静态采集5min。

5、紫杉醇治疗方案将紫杉醇溶于DMSOI用PBS缓冲液稀释到所需浓度。将实

验小鼠分为治疗组和对照组,每组12只。

治疗组给予0.1ml的紫杉醇(10mg/kg),对照组给予0.1ml的PBS溶液，每3天

给药一次,连续给药6次。6、免疫组织化学分析将生物学分布研究中处死小鼠

的肿瘤组织做免疫组织化学分析。

将肿瘤组织4%多聚甲醛固定后,制备成石蜡切片,利用抗CD34抗体进行免疫组织

化学染色,定量分析肿瘤的微血管密度。实验结果1、