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范以辉等：戈谈分光光度法和分光光度计的原理及其应用『皿
浅谈分光光度法和分光光度计的原理及其应用
ＤｉｓｃｕｓｓｉｎｇＰｒｉｎｃｉｐｉｕｍａｎｄＡｐｐｌｙｆｏｒＲａｎｇｅＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ
范以辉惠焕强
（南京市计量监督检测院，江苏南京２１００３７）
摘要：近几年分光光度计越来越多的进入各行各业。但有些单位对分光光度计的工作原理不是很了解。我们在此重述分光光度法和分光光度计的
原理及其应用。
关键词：分光光度法；分光光度计；原理及应用
分光光度法是比色法的发展。比色法只限于在可见振动能级和转动能级的跃迁。得到的光谱为红外光谱。
光区，分光光度法则可以扩展到紫外光区和红外光区。若以能量更低的远红外线０．０２５ｅＶ一０．００３ｅＶ照射分
比色法用的单色光是来自滤光片，谱带宽度从（４Ｏ一子，只能引起转动能级的跃迁，这种光谱称为远红外光
１２０）ｎｍ，精度不高，分光光度法则要求近于真正单色光，谱。由于物质结构不同对上述各能级跃迁所需能量都不
其光谱带宽最大不超过（３—５）ｎｍ，在紫外区可到Ｉｎｍ样，因此对光的吸收也就不一样，各种物质都有各自的
一
以下，来自棱镜或光栅，具有较高的精度。吸收光带，因而就可以对不同物质进行鉴定分析，这是光
能从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离出度法进行定性分析的基础。根据朗伯一比耳定律：当入
来并测量其强度的仪器称为分光光度计。射光波长、溶质、溶剂以及溶液的温度一定时，溶液的光
分光光度计因使用的波长范围不同而分为紫外光密度和溶液层厚度及溶液的浓度成正比，若液层的厚度
区、可见光区、红外光区以及万用（全波段）分光光度计定，则溶液的光密度只与溶液的浓度有关，吸光度与被
一
等。无论哪一类分光光度计都由下列五部分组成，即光测物质的浓度成正比，这就是光度法定量分析的依据。
源、单色器、狭缝、样品池，检测器系统。３分光光度计的构造原理
１光的基本知识将一束复合光通过分光系统，将其分成一系列波长
光是由光量子组成的，具有二重性，即不连续的微粒的单色光，任意选取某一波长的光，根据被测物质对光的
和连续的波动性。波长和频率是光的波动性和特征。可吸收强弱进行物质的测定分析，这种方法称为分光光度
法，分光光度法所使用的仪器称为分光光度计。各种型
用下式表示：Ａ＝号
号的分光光度计的基本结构都相同，由如下五部分组成：
ｙ
式中：Ａ一为波长，具有相同的振动相位的相邻两点①光源（钨灯、卤钨灯、氢弧灯、氘灯、汞灯、氙灯、激光光
间的距离叫波长；为频率。即每秒钟振动次数；Ｃ一为源）；②单色器（滤光片、棱镜、光栅、全
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