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使用hTERT启动子联合RNAi靶向逆转乳腺癌
MCF-7/ADR的耐药性的开题报告
一、背景及研究目的
乳腺癌是女性最常见的肿瘤之一，化疗是其主要治疗方式之一。然
而，乳腺癌患者中耐药性的存在给化疗带来了极大的挑战。因此，研究
如何解决耐药性的问题是非常重要的。
在一系列的体内外研究中，Telomerasereversetranscriptase
(hTERT)启动子的增强活性已被证明在癌细胞中高表达。同时，hTERT启
动子也是一个适合于癌症治疗的潜在经典和新兴的靶标。因此，我们选
择利用hTERT启动子联合RNAi靶向逆转乳腺癌MCF-7/ADR的耐药性。
本研究的目的是通过hTERT启动子联合RNAi技术调控耐药性相关
基因的表达，增强化疗对MCF-7/ADR细胞的敏感性，为进一步研究乳腺
癌耐药性的克服提供理论和实验基础。
二、研究方法
1.构建hTERT启动子联合RNAi质粒
设计具有目的性的hTERT启动子相关siRNA，克隆到质粒中，转染
到MCF-7/ADR细胞中。检测表达的RNA干扰效果。
2.检测获得细胞的hTERT启动子的高表达和RNAi技术的效果
通过实时荧光定量PCR和Westernblotting检测获得细胞的hTERT
启动子的高表达和RNAi技术对耐药相关基因的干扰效果。
3.药物敏感性测定
MTT法检测MCF-7/ADR细胞对多种抗肿瘤药物的敏感性变化，评估
hTERT启动子联合RNAi技术对其敏感性的影响。
4.流式细胞术
使用荧光型Annexin-v/PI双染色液进行细胞凋亡分析，探讨
hTERT启动子联合RNAi技术对MCF-7/ADR细胞凋亡的影响。
三、预期结果及意义
我们预计hTERT启动子联合RNAi技术可以调控耐药性相关基因的
表达，促进化疗对MCF-7/ADR细胞的敏感性，并且可以诱导细胞凋亡。
此外，本研究结果为进一步研究乳腺癌耐药性的克服提供了新思路和实
验基础。
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