原创力文档- 1、本文档共3页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
维普资讯
Ｍｅｄｉｃｉｎｅ—．ｎ１７．２Ｎｏ．１Ｍａｒ．．２００２
应用ＮＡＳＢＡ定量检测ＨＣＶＲＮＡ的研究进展
骆利敏黄建生李明
第一军医犬学热带病研究所（广州５１００１５）
【捕要】ＮＡＳＢＡ（ｎｕｃ｜ｅｌｃａｃｉｄｓｅｑｕｅｎｃｅ￣ｂａｓｅｄａｍｐ｜ｆｉｉｃａｔｉｏｎ）Ｐ４￣桉酸序列依赖性扩增法，是由一对引物介导的、连
续均一的、体外特异性棱苷酸序列等温扩增的ＲＮＡ新技术。反应在４２＂Ｃ进行，可在２ｈ内将１ＬＮＡ模板扩增约ｌＯ
倍。本文综述ＮＡＳＢＡ在ＨＣＶＲＮＡ定量检测中的应用。
【关键词】ＮＡＳＢＡ；ＨＣＶ；检测
中围分类号：Ｐｃ５１２６３文献标识码：Ａ文章编号：０２５４—９００Ｘ（２００２｝０１—００６４—０３
１９９１年，加拿大Ｃａｎｇｅｎｅ公司首先介绍了核酸高温变性步骤，不会受到外来双链ＤＮＡ的污染。
序列依赖性扩增法（ｎｕｃｌｅｕｉｃａｃｉｄｓｅｑｕｅｎｃ￣ｂａｓｅｄ且反应速度快，忠实性好，特异性强，敏感性高。若
ａｍｐ１ｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ＮＡＳＢＡ），与普通ＰＣＲ不同的是，反应中加人变性步骤，ＮＡＳＢＡ不仅能扩增ＲＮＡ，而
ＮＡＳＢＡ是由一对引物引导的，连续均一的体外特且能扩增双链ＤＮＡ。
异性核苷酸序列等温扩增的酶促反应。反应在Ｆ义ｓＲＮＡ
４２℃进行，可在２ｈ内将模板ＲＮＡ扩增１０。倍，此、一
ｔ
ｍ～
常规ＰＣＲ法高ｌ０倍，不需特殊仪器，是一种快速，
简便，特异的扩增手段。ＮＡＳＢＡ既可检测ＲＮＡ，又
可用于ｍＲＮＡ测序。在病原体检测，基因异常的筛ＡＨ日＾
选，肿瘤的诊断与监控，疾病易发性检测等方面，也
～
有着广阔的应用前景。竹ｔｔＮＡ多聚酶
反义自ｓＨＡ
扩增
ＮＡｓＢＡ的１原理引物２～、＾Ｔ７ＲＮＡ多聚酶
标准ＮＡＳＢＡ反应体系包含ＡＭＶ（鸟成髓细胞半；；；●ＡＭＹＲＴ
Ｉ不同温度扩增
瘤病毒）逆转录酶，ＲＮＡ酶Ｈ，ＲＮＡ聚合酶，
ｄＮＴＰ，ＮＴＰ，两个特殊的引物和适宜的缓冲掖。引引斯１
物Ｉ长约４５ｎｔ，３末端约有２０ｎｔ与模板３互补，其围１桉酸序列依赖性扩增法示意围
５末端含有可被ＴＲＮＡ７聚合酶识别的启动子序（ＲｅｅｓｌｎｋＨＷＨｅｐａｔｉｔｉｓＣＶｉｒｕｓ．ＫＡＲＧＥＲ，１９９８：７
文档评论（0）