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Twist1基因对膀胱癌上皮间质转化的影响

王小林;曹广鑫;侯建全

【摘要】目的：探讨Twist1基因对膀胱癌上皮间质转化（EMT）过程的影响。方

法：上调Twist1基因的表达，实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测膀胱癌细胞中

EMT相关基因表达情况。结果：Twist1基因成功转染进膀胱癌T24细胞，转染

Twist1的细胞中Twist1mRNA表达量是转染空载细胞中的11920倍。转染

Twist1组表达量为空载组snail11.2倍，snail21.2倍，E-cadherin0.8倍，

Fibronectin3.2倍，N-caderin1.5倍和VimentinmRNA1.2倍。结论：

Twist1在膀胱癌细胞EMT过程中起到一个正性调控作用，能够促进膀胱癌细胞

EMT过程。%Objective:Toinvestigatetheeffectoftwist1toepithelial

mesenchymaltransition(EMT)inbladdercan-cer.Methods:TheExpression

ofTwist1wasupgraded,andtheexpressionsofEMTmarkersinbladder

cancerweredetect-edbyQPCR.Results:Twist1wassuccessfully

transfectedintoT24,expressionsofTwist1mRNAwere11920timesas

muchasinthecontrol.Snail1,snail2、E-cadherin、Fibronectin、N-caderin、

VimentinmRNAwere1.2、1.2、0.8、3.2、1.5、1.2timesasmuchasinthe

controlrespectively.Conclusions:Twist1actsasapositiveregulatoryroleto

EMTinbladdercancer,andmaypromoteEMTinbladdercancer.

【期刊名称】《交通医学》

【年(卷),期】2015(000)003

【总页数】3页(P231-233)

【关键词】膀胱癌;Twist1基因;上皮间质转化;实时定量聚合酶链反应

【作者】王小林;曹广鑫;侯建全

【作者单位】南通市肿瘤医院泌尿外科，江苏226361;南通市肿瘤医院泌尿外科，

江苏226361;苏州大学附属第一医院泌尿外科

【正文语种】中文

【中图分类】R737.14

2014年全美大约有74690例新发膀胱癌患者，并有大约15580例患者死于膀

胱癌[1]。上皮间质转化（epithelialmesenchymaltransition，EMT）与膀胱癌

的侵袭、转移密切相关，同时还与膀胱肿瘤分期、分级相关[2]。Twist1作为EMT

中一个重要转化因子如何发挥作用，目前尚不十分清楚。本研究选取膀胱癌T24

细胞作为研究对象，将Twist1转染进T24细胞，检测EMT相关基因（上皮细胞

标记物如E-cadherin，间叶细胞标记物如fibronectin，vementin，N-cadherin）

表达情况，以此了解膀胱癌中Twist1对EMT影响。

1.1材料pcDNA3.1-Twist1合成与载体构建均由invitrogen公司完成。细胞株：

人膀胱癌细胞株T24（中科院上海细胞库）。主要试剂：培养液：RPMI1640

（Hyclone，Cat.:SH30809.01B），10%FBS（Hyclone，Cat.:SV30087.02）。

胰酶（GIBCO，Cat.：25200-072）；PBS（Hyclone，SH30256.01B）。质粒

抽试剂盒：北京艾德莱，Cat.:PL08。转染试剂盒：Lonza，Cat:VCA-1001，

RNA提取试剂盒：TaKaRa，Cat:9767反转录试剂盒：TaKaRa，Cat:RR037A，

PowerSYBRgreenPCRmastermix（2×）：ABI，Cat:4367659。

1.2方法

1.2.1