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植物细胞有丝分裂的制片与观察

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1

一、实验目的

1.掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术

2.观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形

态特征

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2

二、实验原理

1.植物根尖、茎尖等分生区细胞能进行有丝

分裂

2.在有丝分裂过程中,染色体发生规律性动

态变化

3.染色体可被碱性染料着色,便于观察

4.根据显微镜下观察到的染色体特点可识别

有丝分裂不同时期

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三、实验仪器和药品

1.仪器:显微镜、恒温箱、水浴锅、计时器、

烧杯、载玻片、盖玻片、剪刀、

镊子、滴管、刀片、玻璃皿

2.材料:大蒜

3.药品:诺卡氏固定液1mol/L的HCl作为解

离液、卡宝品红作为染色液

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4

四、实验流程

1.大蒜根尖培养及固定:

实验前3-4d,将大蒜掰成蒜瓣摆在铺

有四层纱布的托盘里放入温度为25℃,

一定湿度的培养箱中培养,每天换

水两次待根长到1~2cm将根剪下用吸

水纸吸干水分,将其放入诺卡氏固定液

(乙醇:冰醋酸=3:1)固定4~24小时。

固定的作用:杀死细胞,固定细胞形态,

维持染色体的完整性,提

高染色效果

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5

四、实验流程

1.大蒜根尖培养及固定

2.装片制作

(1)解离

目的:

使组织中的细胞分离开

操作:

先用95%的酒精漂洗,在HCL中

60℃水浴5min左右

(c)解离时,细胞已死亡

(a)解离充分是实验成功的必备条件

注意:

(b)解离过度,细胞结构被破坏

解离液:

1mol/L的HCl

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四、实验流程

1.大蒜根尖培养及固定

2.装片制作

漂洗液:

清水(先置于清水中浸泡2min左右)

目的:

洗去解离液,便于染色

次数:

2-3次

注意:

若不漂洗

解离过度(HCl作用)

影响染色(HCl与碱性染料反应)

(1)解离

(2)漂洗

备注:将漂洗好的根尖放入盛有清水的培养皿中

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四、实验流程

1.大蒜根尖培养及固定

2.装片制作

(1)解离

(2)漂洗

(3)取材

部位:

根尖2-3mm

注意:

要去除根尖乳白色根冠

(根尖分生区)

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成熟区

伸长区

分生区

根冠

根尖的结构

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四、实验流程

1.大蒜根尖培养及固定

2.装片制作

(1)解离

(3)取材

(2)漂洗

(4)染色

操作:

用镊子尖把大蒜根尖弄碎(或者将根尖均

匀切成三份),用卡宝品红染色,6~8分钟后,

盖上盖玻片,再盖上一个载玻片,用拇指轻

压载玻片,随即用一次性筷子进行敲片。

目的:

使细胞分散开,有利于观察

注意:

染色时敲片的力度要适中

染色剂:

卡宝品红染液

时间:

6-8min

(使染色体(质)着色)

染色时间过长—细胞全被染色,

无法观察

染色时间过短—染色体颜色过浅,

影响观察

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四、实验流程

1.大蒜根尖培养及固定

2.装片制作

解离→漂洗→取材→染色

3.观察

(1)低倍镜观察:

找到分生区细胞

特点:

细胞呈矩形,排列紧密,有分裂细胞

(2)高倍镜观察:

在低倍镜的基础上换用高倍镜

(3)仔细观察:

先找中期,再找其余各时期,注意染色体特点

(4)移动观察:

慢慢移动装片,完整观察各个时期

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四、实验流程

1.大蒜根尖培养及固定

2.装片制作

解离→漂洗→取材→染色

3.观察

低倍镜观察→高倍镜观察→仔细观察→移动观察

注意:

a.观察时应先找到呈矩形的分生区细胞,在一个视野里观察时,要注意边观察边移动装片,观察有丝分裂各个时期。

b.显微镜下观察到的都是死细胞,不能看到细胞分裂的动态变化。

c.在显微镜下观察到间期细胞的数目最多

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操作要点

1.解离:培养好的根尖先用95%的酒精漂洗再放入1mol

/L的HCl中60℃水浴5min左右

2.漂洗:先在清水中浸置2min,再用清水洗去解离液2-3

次,最后置于盛有清水的培养皿中

3.取材:用刀片切取根尖2-3mm处的分生区,并切去乳白

色的根冠

4.染色:用镊子尖把大蒜根尖弄碎(或者用刀片将根尖

均匀切成三份),用卡宝品红染色,6~8min后,

盖上盖玻片,再盖上一个载玻片,用拇指轻压载

玻片随即用一次性筷子进行敲片。

5.观察:首先在低倍镜进行观察,再到高倍镜下观察。

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五、实验结果对比图

间期

前期

中期

后期

末期

后期与末

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