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蔗糖水解速率常数的测定——旋光法
一、实验目的：
1、掌握旋光度与蔗糖转化反应速率常数的关系；
2、掌握与的测定方法；
3、了解自动旋光仪的使用方法。
二、实验原理：
酶是生物体内产生的具有极高催化活性和选择性的蛋白质类物质，它的
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催化活性比其他催化剂高10～10倍。
蔗糖酶是一种水解酶，它能使蔗糖在水中水解成葡萄糖和过堂，反应式
如下：
由于反应时水是大量的，在整个反应过程中浓度保持不变，所以该反应动
力学公式符合米恰利-门顿方程:
对上式积分并除以时间t，可得：
由此式可以求出的值。
若以表示实验开始时蔗糖溶液的旋光度，表示在任意时刻时的旋光度，
表示反应完成后的旋光度，则蔗糖的原始浓度与成正比，t时刻溶液中剩余蔗糖
的浓度与成正比，因此上式可变为：
若将对作图，应得一直线，
其斜率为：
其截距为：
三、实验仪器及试剂
旋光仪、恒温水浴槽、台秤、停表、吸量管2支、锥形瓶、烧杯等；
HCl溶液（4mol/L）、蔗糖（分析纯）；
四、实验步骤
⑴准备工作：
1、用台秤粗称蔗糖5g，放入锥形瓶中，准确移入水50ml并量取水溶液的温度备用；
2、旋光仪零点调节：在旋光管中注入纯水，放入旋光仪暗箱中，开启旋光仪电源预热5分
钟，再开启直流电源开关，待钠光灯稳定后，开启测量开关，光屏应显示值为00.000,
若示值不为00.000，可按清零键使其归零。
⑵测量工作：
1、α的测量：
t
在上述配置的糖水中准确加入50mL3MHCl溶液，迅速混匀并注入旋光管中，在旋光
仪中测量αt值，测量中每3分钟读取一次Xt值，共读12次（切记测量中不可动清零键）。
2、α的测定：
∞
将步骤⑵.1中所余的反应液在50℃下水浴中恒温加热30min之后降至室温，测其旋光度即
为X(注意：反应液的加热可与⑵.1步骤同时进行)。
∞
五、实验记录及数据处理
（一）实验记录
1、水温17.1℃
2、α的测定：
t
t/min0369121518
α12.01011.59011.09510.58510.0909.4958.985
t
t/min212427303336
α8.4057.8957.3006.7806.1955.690
t
2、α的测量：
∞
α－3.935－3.965－3.945
∞
（二）实验数据处理
α＝－（3.935＋3.965＋3.945）÷3≈－3.950；
∞
则根据实验原理方程可的如下数据表格:
t/min0369121518
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