老年人龋坏组织中变形链球菌和乳酸杆菌的致龋特点.pdfVIP

老年人龋坏组织中变形链球菌和乳酸杆菌的致龋特点.pdf

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老年人龋坏组织中变形链球菌和乳酸杆菌的

致龋特点

作者:周建业张金婷肖云车团结何祥一

【摘要】目的探讨老年人龋坏组织中变形链球菌(MS)和乳酸

杆菌(LB)在致龋过程中的特点。方法136例龋坏组织样本按患者年

龄、患牙龋坏程度和龋坏活跃性分组,利用选择性培养基对MS及LB

行分离、培养和鉴定。统计两种细菌在不同组别中细菌菌落形成单位

(CFU)计数及两种细菌致龋样本例数。结果在老年龋组、严重龋组

(中、深龋)和活动期龋组中,MS与LB的CFU计数均显著升高(均P

<0.05);MS与LB共同致龋样本数在老年龋组中显著升高(P<0.05),

并随龋坏程度的加重而升高(P<0.05)。结论在老年龋病及中、深龋

中,MS与LB为互生关系,有明显共同致龋作用。

【关键词】变形链球菌;乳酸杆菌;老年人;龋坏组织

变形链球菌(MS)和乳酸杆菌(LB)与龋病的形成和发展密切相

关。MS是口腔主要致龋菌,对其在细菌毒力、致龋机制方面已有研究

〔1〕,而有关LB的致龋作用颇有争议,有学者认为LB是龋坏的结果

而不是龋坏的原因〔2〕;另有研究认为在致龋初期LB并不致龋,而在

龋坏进入深层时,LB由于其较强的耐酸性而大量繁殖并产酸,协同MS

致龋〔3〕;有人指出LB有可能因抑制龋病病原菌的繁殖而抑制龋病的

发展〔4~5〕。本研究通过分离、培养及鉴定136例龋坏组织样本中的

MS和LB,探讨MS与LB的致龋特点及老年龋病患者龋坏组织中的菌与

龋病严重程度的关系。

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1材料与方法

1.1细菌培养基与鉴定方法细菌培养基采用改良轻唾琼脂培养

基(MS)〔6〕与Rogasa培养基(LB)〔7〕,分别采用DentocultSM法

和DentocultLB法鉴别MS和LB致龋活跃性。

1.2方法

1.2.1采样及样本分组龋坏组织样本,由同一操作者于2006

年11月~2007年3月在本院、甘肃省第二人民医院及兰州军区总医

院口腔科的90位患者(136颗患牙)采集,每患牙采集1例样本,共

取样本136例。研究对象无系统疾病,采样前2w内未使用任何抗生

素药物,并知情同意。准备盛有1.0ml灭菌生理盐水1.5ml离心管

及1#挖器(Q/ILLS0022001),常规无菌操作采样。采样过程如下:

先将挖器前端置酒精灯外焰烧灼灭菌(3次,6~7s/次),将取样部

位进行冲洗、隔湿、干燥,然后刮取龋坏组织至平1#挖器勺部。将

所取样本浸入离心管液体中,轻摇、混匀。将离心管标号,2h内送

检。所剩样本加300μl80%甘油,冻存备用(-20℃)。将样本按照

年龄分为老年组(年龄≥60岁)、恒牙组(年龄12~59岁)和乳和替

牙组(年龄≤13岁);按龋坏程度分为浅龋、中龋和深龋组;按龋病

活跃性分为活动期组和静止期组。

1.2.2细菌接种及孵化将样本混匀后,分别取20μl接种于两

种培养皿,20%O2、80%CO2、37℃恒温条件下培养48h。

1.2.3细菌形态学及专用培养基鉴定MS菌落为透明、边缘略整

齐、中心微隆起似雨滴状菌落;LB菌落乳白色、边缘略不整齐、中心

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微隆起菌落。随机法,将本实验分离获得的两种细菌分别二次克隆后

接种于DentocultS

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