DB22T 3193-2020 番茄灰霉病诊断与防治技术规程.docxVIP

ICS65.020B05

DB22

吉林省地方标准DB22/T3193—2020

番茄灰霉病诊断与防治技术规程

Codeofpracticefordiagnosisandcontrolagainsttomatogreymold

2020-11-23发布2020-12-30实施

吉林省市场监督管理厅发布

I

DB22/T3193—2020

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由吉林省农业农村厅提出并归口。本文件起草单位：吉林农业大学。

本文件的主要起草人：王晓梅、陶淑霞、孙周平、赵秀香、曹国先、崔四川、曲梦楠、赵子健、王瑶、张丹。

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DB22/T3193—2020

番茄灰霉病诊断与防治技术规程

1范围

本文件规定了番茄灰霉病的病害诊断与防治技术。

本文件适用于番茄灰霉病的病害诊断、病原鉴定和综合防治。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T8321(所有部分)农药合理使用准则NY/T1276农药安全使用规范总则

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

番茄灰霉病tomatograymold

由灰葡萄孢菌(BotrytiscinereaPers.exFr.)侵染番茄引起的一种真菌性病害。

3.2

聚合酶链式反应polymerasechainreaction,PCR

是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法。

4番茄灰霉病诊断与防治技术程序的构成

番茄灰霉病诊断与防治技术程序主要包括以下几个阶段，程序流程图如图1所示。

症状诊断(见5.

症状诊断(见5.1)?

确定病原与病害种类

病原诊断(见5.2)?

农业防治(见6.2.1)eh

生态防控(见6.2.2)?

化学防控(见6.3.3)?p

病害综合防治

田间病害采集

图1

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5病害诊断

5.1症状诊断

5.1.1茎叶症状

叶片染病，多从叶尖开始，病斑呈“V”字形向内扩展，初期呈水渍状，浅褐色，有不明显的深浅相间轮纹，潮湿时，病斑表面生有灰色霉层；茎部染病，多发生在分枝处或基部，初期产生水渍状小点，后迅速扩展成长椭圆形，潮湿时，表面会有灰色霉层，茎部染病严重的可以绕茎一周，病枝易折断，有时病部以上植株枯死。典型症状见附录A.1。

5.1.2花果症状

花上染病，病菌多从柱头和花瓣侵入，潮湿时，病部会有灰色霉层；幼果染病，多从果柄向果面扩展，在果柄附近形成灰褐色至黄褐色坏死斑，空气湿润时果面上会有灰色霉层，后期会引起花瓣、果实腐烂。典型症状见附录A.1。

5.2病原诊断

5.2.1显微观察

在普通光学显微镜10×10倍下进行形态观察，病菌的孢子梗数根丛生，褐色，顶端具1次～2次分枝，分枝顶端密生小柄，其上生大量分生孢子。分生孢子圆形至椭圆形，单细胞，近无色，大小(5.5μm～16μm)×(5.0μm～9.25μm)，分生孢子梗(811.8μm～1772.1μm)×(11.8μm～19.8μm)。病原菌形态图见附录A.2。

5.2.2分子检测

5.2.2.1单孢分离

采集具有典型灰霉病病斑的番茄病叶，用毛刷刷取叶片上的孢子于盛有无菌水的烧杯中，采用稀释平板法，挑取单个孢子，放置PDA培养基上培养，27℃条件下黑暗培养3d，待产孢后镜检，初步确定为灰葡萄孢后进行菌丝扩繁培养。

5.2.2.2DNA提取

采用CTAB法，提取病菌基因组DNA。具体方法按附录B.1的要求执行。5.2.2.3PCR扩增

以基因组DNA为模板，采用通用引物ITS4/ITS5（ITS4：5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’/ITS5：5’-GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3’）对病原物ITS区域扩增，PCR反应参数按附录B.2的要求执行。PCR产物送交生物技术公司进行测序。

5.2.2.4BLAST比对

测序结果在GenBank中进行BLAST比对分析，确定为灰葡萄孢菌。

6综合防治

6.1防治原则

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