DB32T 1879-2011 黑莓中鞣花酸含量的测定高效液相色谱法.docxVIP

ICS65.020.01B31

备案号：31279-2011

江苏

省

地

DB32

方标准DB32/T1879-2011

黑莓中鞣花酸含量的测定高效液相色谱法

MethodfordeterminationofEllagicAcidinBlackberryHighPerformanceLiquidChromatographyMethod

2011-08-15发布2011-10-15实施

江苏省质量技术监督局发布

DB32/T1879-2011

I

前言

本标准按GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》的规定编制。本标准由江苏省农业科学院提出。

本标准起草单位：江苏省农业科学院农产品加工研究所。

本标准主要起草人：刘小莉、周剑忠、单成俊、王英、李莹、张丽霞。

DB32/T1879-2011

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黑莓中鞣花酸含量的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了用高效液相色谱法测定黑莓中鞣花酸含量的方法。

本标准适用于黑莓鲜果、黑莓叶子、黑莓籽等产品中鞣花酸的测定。

本方法最低检测限为黑莓鲜果中鞣花酸含量在0.2mg/100g、黑莓叶和黑莓籽中鞣花酸含量在1mg/100g以上。

2规范性引用文献

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法

3原理

利用鞣花酸的结构特性，是没食子酸的二聚衍生物，是一种多酚二内酯，呈反式没食子酸单宁结构，有多个共轭双键结构，在254nm处有最大吸收峰。

4仪器设备

4.1高效液相色谱仪，配有紫外检测器

4.2电子分析天平

4.3高速组织捣碎机

4.4超声波清洗器

4.5高速离心机

5试剂和溶液

以下所用试剂和水，除特别注明者外均为分析纯试剂，水为符合GB/T6682-2008中规定的三级水。

鞣花酸标准溶液：准确称取鞣花酸标准品5.0mg，以色谱纯甲醇溶解，并定容至5mL，摇匀，配成浓度为1mg/mL的母液，4℃保存；

无水乙醇；

乙腈，色谱纯；

磷酸；

石油醚。

6试样制备

DB32/T1879-2011

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6.1黑莓鲜果

准确称取250g新鲜黑莓样品，加100ml去离子水，用高速组织捣碎机打浆。取50ml匀浆，加入等体积的无水乙醇，于超声波中处理20min后，10000转/分钟离心10min，取上清，沉淀中加入50ml50%乙醇溶液按上述步骤重复提取2次，合并上清，定容至200ml。以0.45μm滤膜过滤后4℃保存备用。

6.2黑莓叶子

新鲜黑莓叶子于电热恒温干燥箱50℃烘干至恒重，用高速粉碎机粉碎1min，过孔径0.28mm筛后备用。准确称取5g黑莓叶粉末，加40ml50%乙醇溶液，于超声波中处理20min后，10000转/分钟离心10min，取上清，沉淀中加入50ml50%乙醇溶液按上述步骤重复提取2次，合并上清，定容至200ml。以0.45μm滤膜过滤后4℃保存备用。

6.3黑莓籽

新鲜黑莓种籽于电热恒温干燥箱50℃烘干至恒重，用高速粉碎机粉碎1min，过孔径0.28mm筛后备用。准确称取5g黑莓籽粉末，加入40ml石油醚，100转/分钟振荡30min，弃去石油醚层，残余黑莓籽中加40ml50%乙醇溶液，于超声波中处理20min后，10000转/分钟离心10min，取上清，沉淀中加入50ml50%乙醇溶液按上述步骤重复提取2次，合并上清，定容至200ml。以0.45μm滤膜过滤后4℃保存备用

7检测方法

7.1高效液相色谱条件

色谱柱：ZORBAXSB-C18柱（4.6×250mm，5μm）

流动相：乙腈-1.2%磷酸（18：82），流速1mL/min

温度：30℃

进样量：20μL

检测器：紫外检测器，波长254nm

7.2标准曲线

用流动相稀释标准储备液，配制系列浓度的标准工作溶液：5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、100μg/mL。在上述色谱条件下测定，以峰面积为纵坐标、相应的标准工作溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。鞣花酸标样的高效液相色谱图见附录A。

7.3样品检测

将过滤后的试样溶液在上述色谱条件下测定，用峰面积在标准曲线上计算试样溶液中鞣花酸的浓度。

7.4结果计算与表达

7.4.1