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柱凝集法交叉配血试验操作规程2024
1.原理
柱凝集法交叉配血是通过抗原-抗体在凝胶卡的反应室中反应后离心通过
预先装填有抗IgG的凝胶柱。凝集的红细胞将会被截留在凝胶柱的顶部或
柱体中,而不凝集的红细胞则将在凝胶柱的底部。
2试剂
柱凝集配血卡。
3.操作
3.1“”“”
1取凝胶抗球蛋白微柱卡,标记号(2次侧
主侧),号()。
3.2主侧:配制细胞悬液,通常清况下使用供应商提供的稀释液将献血者
红细胞配成%的悬液(根据厂商的操作说明书而定)轻轻滴人号微
150µ11
管反应池中,再加25µ1受血者血清。
3.3次侧:配制细胞悬液,通常清况下使用供应商提供的稀释液将受血者
红细胞配成%的悬液(根据厂商的操作说明书而定)轻轻滴人2号微
150µ1
管反应池中,再加25µ1献血者血清。
3.4阴印捆:配制细胞悬液,通常情况下使用供应商提供的稀释液将受
血者红细胞配成%的悬液轻轻滴入号微管反应池中再加
150µ1225µ1AB
型血清。
3.5将已加好反应物的凝胶卡放入37°15
C孵育分钟。
3.6取出凝胶卡,立即用专用离心机离心,通常离心的速度被设定在
1000r/min(80xg~100xg离心10分钟后,观察结果。
4结果判定
4.1若对照管细胞沉淀在管底,检测管凝集块在胶上或胶中判读为阳性。
5-1).
结果判断参照图示(见图1-
图片
4.2若对照管和检测管的细胞沉淀均在管底判读为阴性。
4.3若对照管细胞在胶上或胶中说明试验失败应重新试验。
5注意事项
5.1每种柱凝集卡都分为反应室和凝胶柱两部分操作时,向反应池内要先
加红细胞悬液,后加血清或抗体。
5.2不同的厂商所提供的柱凝集试验要求的细胞与血清的比例不同,一般
50µ11%红细胞悬浮加25µ1血清;50µ10.8%红细胞悬浮加40µ1血清。
5.3除上述两种配血方法之外,常用的还有快速的聚凝胺介质配血LISS
、
介质配血以及增强反应的酶法配血等。这些方法具有一些局限性,通常用
千特殊情况下的配血。
柱凝集法能对微弱的抗原或抗体进行反应,大大提高了试验的敏感度,便
于自动化标准化,重复性好,结果稳定,结果观察直观。但孵育离心
、、
时间较长,不适用千特别紧急的配血。
考文献(1]尚红,王毓三,申子瑜全国临床检验操作规程(第4版)[M].
北京:人民卫生出版社,
2019.
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