柱凝集法交叉配血试验操作规程2024 .pdf

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柱凝集法交叉配血试验操作规程2024

1.原理

柱凝集法交叉配血是通过抗原-抗体在凝胶卡的反应室中反应后离心通过

预先装填有抗IgG的凝胶柱。凝集的红细胞将会被截留在凝胶柱的顶部或

柱体中,而不凝集的红细胞则将在凝胶柱的底部。

2试剂

柱凝集配血卡。

3.操作

3.1“”“”

1取凝胶抗球蛋白微柱卡,标记号(2次侧

主侧),号()。

3.2主侧:配制细胞悬液,通常清况下使用供应商提供的稀释液将献血者

红细胞配成%的悬液(根据厂商的操作说明书而定)轻轻滴人号微

150µ11

管反应池中,再加25µ1受血者血清。

3.3次侧:配制细胞悬液,通常清况下使用供应商提供的稀释液将受血者

红细胞配成%的悬液(根据厂商的操作说明书而定)轻轻滴人2号微

150µ1

管反应池中,再加25µ1献血者血清。

3.4阴印捆:配制细胞悬液,通常情况下使用供应商提供的稀释液将受

血者红细胞配成%的悬液轻轻滴入号微管反应池中再加

150µ1225µ1AB

型血清。

3.5将已加好反应物的凝胶卡放入37°15

C孵育分钟。

3.6取出凝胶卡,立即用专用离心机离心,通常离心的速度被设定在

1000r/min(80xg~100xg离心10分钟后,观察结果。

4结果判定

4.1若对照管细胞沉淀在管底,检测管凝集块在胶上或胶中判读为阳性。

5-1).

结果判断参照图示(见图1-

图片

4.2若对照管和检测管的细胞沉淀均在管底判读为阴性。

4.3若对照管细胞在胶上或胶中说明试验失败应重新试验。

5注意事项

5.1每种柱凝集卡都分为反应室和凝胶柱两部分操作时,向反应池内要先

加红细胞悬液,后加血清或抗体。

5.2不同的厂商所提供的柱凝集试验要求的细胞与血清的比例不同,一般

50µ11%红细胞悬浮加25µ1血清;50µ10.8%红细胞悬浮加40µ1血清。

5.3除上述两种配血方法之外,常用的还有快速的聚凝胺介质配血LISS

介质配血以及增强反应的酶法配血等。这些方法具有一些局限性,通常用

千特殊情况下的配血。

柱凝集法能对微弱的抗原或抗体进行反应,大大提高了试验的敏感度,便

于自动化标准化,重复性好,结果稳定,结果观察直观。但孵育离心

、、

时间较长,不适用千特别紧急的配血。

考文献(1]尚红,王毓三,申子瑜全国临床检验操作规程(第4版)[M].

北京:人民卫生出版社,

2019.

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