化妆品中地索奈德等4种糖皮质激素检验方法与风险研究 .pdfVIP

化妆品中地索奈德等4种糖皮质激素检

验方法与风险研究

摘要：糖皮质激素（Glucocorticoids,GC）是一类共同拥有环戊烷骈多氢菲

结构目核的甾体激素，是机体内极为重要的一类调节分子。它对机体的发育、生

长、代谢以及免疫功能等起着重要调节作用，是机体应激反应最重要的调节激素，

也是临床上使用最为广泛而有效的抗炎和免疫抑制剂，具有抗炎、抗毒、抗过敏、

抗休克、非特异性抑制免疫及退热作用等多种作用，可以防止和阻止免疫性炎症

反应和病理性免疫反应的发生。

关键词：化妆品；糖皮质激素检验

1仪器与材料

1.1仪器

ThermoFisherScientificVanquish超高效液相色谱仪、ThermoFisher

ScientificTSQEndura三重四级杆液质联用仪、涡旋震荡器（江苏康健）、

AllegraX-30R冷冻离心机（贝克曼）、XPE204万分之一天平（梅特勒-托利多）、

MSA225S-1CE-D1十万分之一天平（赛多利斯）、KQ-800KDE超声提取仪（昆山市

超声仪器有限公司）、AgilentTechnologies全自动固相萃取仪、Thermo

Hyper⁃silGoldC18色谱柱（100×2.1mm1.9μm）。

1.2材料与试剂

标准品：地索奈德（Desonide，公司：CATOResearchChemicalsInc，批

号：Y0001553，含量：100%）、环索奈德（Ciclesonide，公司：EPRS，批号：

Y0001553，含量：100%）、氟尼缩松（Flunisolide，公司：HPC批号：785380，

含量：100%）、氯二氟美松（Halometasone，公司：TorontoResearch

ChemicalsINC，批号：11-GUY-35-6，含量：100%）。试剂：乙腈和乙酸

（ThermoFisherScientific，分析纯）、氯化钠（重庆川东，分析纯）、亚铁

氰化钾和醋酸锌（成都市科龙化工，分析纯）。材料：WatersOasisHLB固相萃

取小柱。样品：样品均是市场抽检样品（市售）。

2方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱：ThermoHypersilGoldC18(100×2.1mm1.9μm），柱温：40℃；

流动相：含0.1%乙酸乙腈（A），含0.1%乙酸水（B）。梯度洗脱（0.0～

2.0min,20%A;2.0～8.0min,20%A→80%A;8.0～9.0min,80%A;9.0～

9.5min,80%A→20%A;9.5～12min,20%A）。流速为0.3mL/min，进样量为0.2μl。

2.2质谱条件

采用电喷雾源（ESI），喷雾电压为3500V，鞘气流速为25(Arb），辅助气

流速为10(Arb），尾吹气流速为0(Arb），离子传输管温度为350℃，雾化器温

度为350℃。采用正离子模式，多级反应监测（MRM）。质谱参数见表1。

表1质谱参数

2.3溶液的配制

2.3.1标准品工作储备溶液的配制

准确称取地索奈德、环索奈德、氟尼缩松和氯二氟美松标准品各约10mg，至

100mL量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，混匀后作为标准品储备液。精密量取

标准品储备液1.0mL，至10mL量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，作为标

准品工作储备溶液。

2.3.2供试品溶液的配制

准确称取样品约0.2g，置于10mL离心管中，加入3mL饱和氯化钠溶液，涡

旋30s；加入2mL乙腈，重复提取两次取上清，合并两次乙腈提取液；加入40mL

高纯水，混匀；加入10%的亚铁氰化钾水溶液0.2mL，混匀；再加入20%的乙酸锌

水溶液0.2mL，混匀；5000r/min离心10min，上清液经OasisHLB固相萃取小柱

富集净化后，用5mL甲醇淋洗小柱，淋洗液经0.22μm滤膜过滤后作为供试品溶

液。

2.4定量实验

2.4.1线性关系考察

精密量取2.3.1项下标准品工作储备液，用50%甲醇稀释成每mL中分别含

10、20、40、100、200、400、800、1000ng的标准溶液，作为标准品系列溶液。

以标准品溶液的浓度为横坐标，以定量子离子峰面积为纵坐标，拟合线性方程