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pcr上岗证考试题及答案

一、选择题

1.PCR的全称是什么？

A.PolymeraseChainReaction

B.PolymeraseChainResistance

C.PolymeraseChainResearch

D.PolymeraseChainReplication

答案：A.PolymeraseChainReaction

2.PCR被广泛应用于以下哪个领域？

A.食品安全检测

B.疾病诊断

C.法医学鉴定

D.所有以上都是

答案：D.所有以上都是

3.PCR技术主要包括哪几个步骤？

A.反应体系的制备

B.DNA模板的变性

C.短序列引物的合成

D.扩增反应的循环

答案：A、B、C、D

4.PCR扩增反应中，引物的作用是什么？

A.指导DNA复制起始点

B.保护DNA模板不被降解

C.指示PCR反应的终止点

D.促进DNA片段的连接

答案：A.指导DNA复制起始点

5.PCR扩增反应的温度变化有哪几个阶段？

A.变性、退火、延伸

B.变性、合成、退火

C.变性、扩增、退火

D.变性、退火、连接

答案：A.变性、退火、延伸

二、判断题

1.PCR扩增反应的核心酶是DNA聚合酶。

答案：正确

2.PCR技术可以在短时间内扩增大量的DNA片段。

答案：正确

3.PCR扩增反应的主要作用是对DNA进行定序。

答案：错误

4.PCR扩增反应的扩增效果受引物浓度的影响。

答案：正确

5.PCR可以从单一DNA分子开始扩增，得到大量相同的DNA片段。

答案：正确

三、简答题

1.请简要解释PCR扩增反应的基本原理。

答：PCR扩增反应通过反复进行温度变化，使得DNA模板的双链

解开，引物与目标序列结合并通过DNA聚合酶的作用进行DNA复制，

最终得到目标DNA片段的扩增。基本步骤包括变性、退火和延伸。

2.PCR技术在食品安全检测中的应用是什么？

答：PCR技术在食品安全检测中可以用于检测食品中是否存在有害

微生物、致病菌或转基因成分，以保障食品的安全和质量。例如，可

以通过PCR技术检测食品中的大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌的存在情

况，帮助及时发现和处理食品安全问题。

3.PCR扩增反应中的引物设计有何注意事项？

答：引物设计是PCR扩增反应中的关键步骤。引物应选择与目标

序列互补的短片段，在合适的温度下能够与DNA模板序列特异性结合。

此外，引物的长度和浓度也需要进行合理调整，过长或过短的引物可

能导致扩增效果差。引物设计还应避免引物间的互相结合。

四、问答题

1.请简述PCR技术的优点和局限性。

答：PCR技术的优点包括高灵敏度、高特异性、快速、简便等。由

于PCR可以在短时间内扩增大量的DNA片段，因此在病毒感染的早

期诊断、基因检测及法医学鉴定等方面具有广泛应用。

PCR技术的局限性主要包括以下几点：一是对目标序列的设计要求

较高，需要准确获取目标序列的信息；二是可能存在污染和假阳性问

题，需要严格的实验室操作和质控措施；三是PCR扩增反应的限制性，

片段长度过长或过短会影响扩增效果；四是无法对目标DNA序列进行

全面检测，存在局限性。

2.PCR扩增反应中为什么需要变性步骤？

答：PCR扩增反应中的变性步骤通过高温（通常为94-98℃）使

DNA双链解开，即变性，使得DNA的两条链分离。这是因为在后续

的扩增反应中，引物需要与DNA模板序列特异性结合并进行复制。只

有在变性步骤中，DNA双链解开，使得引物能够与目标序列中的互补

部分结合，才能够进行下一步的退火和延伸，从而实现目标序列的扩

增。