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实验一普通光学显微镜的结构与使用方法
一、光学显微镜的基本构造
(一)机械部分
1、镜筒:为安装在光镜最上方或镜臂前方的圆筒状结构,其上端装有目镜,下端与物镜转换器相连。
2、物镜转换器:是安装在镜筒下方的一圆盘状构造。其上均匀分布有3~4个圆孔,用以装载不同放大倍数的物镜。
3、镜臂:为支持镜筒和镜台的弯曲状构造,是取用显微镜时握拿的部位。在使用临时装片时,千万不要倾斜镜臂,以免液体或染液流出,污染显微镜。
4、粗/细准焦螺旋:为调节焦距的装置,位于镜臂的上端或下端。粗准焦螺旋可使镜筒或载物台以较快速度或较大幅度的升降,能迅速调节好焦距使物像呈现在视野中,适于低倍镜观察时的调焦。而细准焦螺旋只能使镜筒或载物台缓慢或较小幅度的升降(升或降的距离不易被肉眼观察到),适用于高倍镜观察,一般在粗调螺旋调焦的基础上再使用细调焦螺旋,精细调节焦距。
5、载物台:是放置被观察的玻片标本的地方。平台的中央有一圆孔,称为通光孔,来自下方光线经此孔照射到标本上。在载物台上通常装有标本移动器(也称标本推进器),移动器上安装的弹簧夹可用于固定玻片标本,另外,转动与移动器相连的两个螺旋可使玻片标本前后左右地移动,这样寻找物像时较为方便。
6、镜柱:为镜臂与镜座相连的短柱。
7、镜座:位于显微镜最底部的构造,为整个显微镜的基座,用于支持和稳定镜体。
(二)光学系统部分
光镜的光学系统主要包括物镜、目镜和照明装置(反光镜、聚光器和光圈等)。
目镜:又称接目镜,安装在镜筒的上端,起着将物镜所放大的物像进一步放大的作用。常见的有5×、10×和15×(×表示放大倍数)的目镜,可根据不同的需要选择使用,最常使用的是10×目镜。目镜的长度与放大倍数成反比。
2、物镜:也称接物镜,安装在物镜转换器上。常用物镜的放大倍数有10×、40×和100×等几种。物镜的放大倍数与其工作距离成反比。当低倍镜被调节到工作距离后,可直接转换高倍镜,只需要用细调螺旋稍加调节焦距便可见到清晰的物像。
不同放大倍数的物镜也可从外形上加以区别,一般来说,物镜的长度与放大倍数成正比,低倍镜最短,而高倍镜的长度较长。显微镜的放大倍数是目镜的放大倍数乘以物镜的放大倍数。放大倍数指的是长度的比值而不是面积的比值。例:放大倍数为100×,指的是这个标本长度放大了100倍,同时宽度也放大了100倍,要是以面积计算,则放大了10,000倍。
低倍镜:放大倍数小,直径大,通光量多,视野亮。
高倍镜:放大倍数大,直径小,通光量少,视野暗。
图1-3物镜的性能参数及工作距离
3、聚光器:位于载物台的通光孔的下方,由聚光镜和光圈构成,其主要功能是光线集中到所要观察的标本上。在聚光器的左下方有一调节螺旋可使其上升或下降,从而调节光线的强弱,升高聚光器可使光线增强,反之则光线变弱。
光圈也称为彩虹阑或孔径光阑,位于聚光器的下端,其外侧有一小柄,可使光圈的孔径开大或缩小,以调节光线的强弱。在光圈的下方常装有滤光片框,可放置不同颜色的滤光片。
4、反光镜:位于聚光器的下方,可向各方向转动,能将来自不同方向的光线反射到聚光器中。反光镜有两个面,一面为平面镜,另一面为凹面镜,凹面镜有聚光作用,适于较弱光和散射光下使用,光线较强时则选用平面镜。
二、显微镜的使用规程
(一)实验时要把显微镜放在座前桌面上稍微偏左的位置,镜座应距桌沿6-7cm左右。
(二)转动转换器,使低倍镜镜头正对载物台的通光孔。先把镜头调节至距载物台1-2cm左右处,然后用左眼注视目镜内,接着用手将反光镜转向光源,把虹彩光圈调至最大,使光线通过反光镜和聚光器反射到镜筒内,这时视野内呈明亮的状态。
(三)将所要观察的玻片放在载物台上,使玻片中央观察的部分位于通光孔的正中央,然后用压片夹压好载玻片。
(四)先用低倍镜观察(物镜10X、目镜10X)。观察之前,先转动粗准焦螺旋,使镜筒下降,使物镜逐渐接近切片。需要注意,不能使物镜触及玻片,以防止镜头将玻片压碎。然后,左眼注视目镜内,同时右眼不要闭合(要养成睁开双眼用显微镜进行观察的习惯,以便在观察的同时能用右眼看着绘图),并转动粗准焦螺旋,使镜筒慢慢上升,不久即可看到玻片中材料的放大物象。
(五)如果在视野内看到的物象不符合试验要求(物象偏离视野),可慢慢移动玻片。移动时应注意玻片移动的方向与视野中看到的物象移动的方向正好相反。如果物象不甚清晰,可以调节细准焦螺旋,直至物象清晰为止。
(六)如果进一步使用高倍物镜观察,应在转换高倍物镜之前,把物象中需要放大的部分移至视野中央(将低倍物镜转换成高倍物镜观察时,视野中的物象范围缩小了很多)。一般具有正常功能的显微镜,低倍镜和高倍镜基本齐焦,在用低倍物镜观察清晰时,换高倍物镜应可以见到物象,但物象不一定很清晰
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