《奶牛活体采卵技术规程》.docxVIP

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FORMTEXT陕西省地方标准

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奶牛活体采卵技术规程

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FORMTEXT陕西省市场监督管理局???发布

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前言

本文件依据GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由陕西省农业农村厅提出并归口。

本文件起草单位：西北农林科技大学、杨凌秾福农牧科技服务有限公司、陕西省畜牧产业试验示范中心。

本文件主要起草人：林鹏飞、靳亚平、王勇胜、肖劲邦、李赫强、谢成运、田满园、王炳科、肖红年、贾永宏。

奶牛活体采卵技术规程

范围

本文件规定了奶牛活体采卵技术中采卵室的基本要求、供体牛筛选与饲养管理、供体牛卵巢刺激前评估、供体牛卵巢刺激程序、活体采卵操作、卵母细胞分级鉴定的技术要求。

本文件适用于奶牛活体采卵技术及其他相关领域的科研需求。

规范性引用文件

本标准采用下列术语和定义下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T26938-2011牛胚胎生产技术规程。

T/DACS002-2021荷斯坦牛体型鉴定操作技术规范。

术语和定义

供体牛donor

指提供优质卵母细胞的良种母牛。

活体采卵ovumpick-up（OPU）

借助专用兽用超声诊断仪，用阴道探头、采卵针、连接系统和负压泵直接从活体供体牛卵巢上抽吸卵泡液中包含未成熟卵母细胞的操作过程。

卵巢刺激superstimulation

OPU前，通过专用兽用超声诊断仪和外源性激素，诱导供体牛卵巢发育更多卵泡，确保卵母细胞质量和适宜大小卵泡的比例，配合后续不同体外胚胎生产的操作方法。卵巢刺激与超数排卵不同，后者需诱导卵泡成功排卵，前者应尽可能保证卵泡以适宜大小存在于卵巢上并避免过度成熟。

采卵室基本要求

仪器

OPU兽用超声诊断仪：包括显示器、OPU专用阴道探头（128阵元、频率5.5Hz～7.5Hz、适配各型号采卵针）、负压泵（吸引压力0kPa～25kPa、0mmHg～200mmHg），恒温器（操作控温范围为38.5±1℃，适配收集管为50mL离心管）、血糖血酮仪。

场地设施

采卵室要求清洁安静、明亮宽敞、温度需8℃～25℃，配备有水电、置物台及设置有防踢链的六柱栏保定架。

药品耗材

所用药品生产厂家应具备生产资质，试剂批号、编号须清晰，试剂和药物应在保质期内并严格按照使用说明书贮存、取用和配置。

药品。兽用注射用促卵泡素（FSH）、注射用前列腺素F2α、孕酮阴道栓，血糖血酮仪试纸、2%盐酸利多卡因、耦合剂、75%酒精、石蜡油、生理盐水、新洁尔灭等。

耗材。一次性采卵针（18G×24/5或1,2×70mm）、硅胶管（1.2mm×2.4mm）、注射器（10mL，20mL、50mL），长臂手套、乳胶手套、口罩、吸水卫生纸等。

供体牛筛选与饲养管理

选拔适用对象

青年母奶牛和成年母奶牛均可作为候选供体牛群体。选择供体牛时，宜根据牧场育种目标、实际生产需要和基因组测序结果，选择具有产奶量、长寿性、繁殖性能、健康度、适应性和抗逆性等优良遗传学价值的母牛。

生产性能分析

调取牧场DHI检测、生产性能和繁殖、疾病治疗等记录。供体牛应满足下列要求：

健康状况良好，排除遗传性疾病与生殖器官疾病；

年产奶量14t以上，生产寿命高于4胎次；

成年母牛应为2～4胎次、产后天数超过45d、卵巢机能已完全恢复；

青年母牛应为9月龄以上、卵巢状态发育良好并至少有1次完整的发情周期。

线性鉴定

参照T/DACS002-2021鉴定供体牛体型。荷斯坦奶牛共划分5个部位：包括体躯容量（18%）、尻部（10%）、肢蹄（20%）、泌乳系统（42%）和乳用特征（10%），20个线性评分性状和23个缺陷性状。按体型鉴定得分划分为6