DB15T-绵羊体外胚胎生产技术规程.pdfVIP

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ICS65.020.30

CCSB44

DB15

内蒙古自治区地方标准

DB15/XXXXX—XXXX

绵羊体外胚胎生产技术规程

TechnicalSpecificationonInVitroEmbryoProductioninSheep

(征求意见稿)

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

内蒙古自治区市场监督管理局发布

DB15/XXXXX—XXXX

前  言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由内蒙古农业大学提出。

本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会(SAM/TC19)归口。

本文件起草单位:内蒙古农业大学、内蒙古赛诺种羊科技有限公司。

本文件主要起草人:张家新、张楠、仇春娟、宋宇坤、范利宏、包梅荣、龚露、陈大勇。

I

DB15/XXXXX—XXXX

绵羊体外胚胎生产技术规程

1范围

本文件规定了绵羊体外胚胎生产过程中的体外成熟、体外受精和早期胚胎体外培养、胚胎移植等内

容。

本文件适用于绵羊体外胚胎生产程序。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,

仅该日期对应版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文

件。

NY/T1234牛冷冻精液生产技术规程

NY/T1571羊胚胎移植技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

体外成熟Invitromaturation

卵母细胞在体外恢复减数分裂并发育到第二次减数分裂中期(MII)这一过程,经历核成熟和细胞

质成熟。

3.2

体外受精Invitrofertilization

哺乳动物的精子和卵子置于适宜的培养条件下使之完成受精的一种技术。

3.3

胚胎移植EmbryoTransfer

将体外或体内生产的优质胚胎移植给另外一个同种、生理状态相同的受体动物体内,使之继续妊娠

发育为新个体的技术。

4器皿清洗和消毒

器皿的清洗和消毒方法参照NY/T1234执行。

1

DB15/XXXXX—XXXX

5体外胚胎生产培养液配制

体外成熟培养液、抽卵液、洗卵液、受精液(IVF液)和胚胎发育液(IVC液)配方见附录A。

6操作前准备

实验室和超净工作台紫外灯,照射20min后用酒精擦拭消毒;待关闭实验室紫外灯30min后,操

作人员将双手清洗干净后,更换拖鞋进入实验室,并随手关闭实验室门;穿戴工作服、口罩、手套、帽

子等;用75%酒精喷洒消毒双手;工作台和加热台消毒灭菌:实验室工作台,显微镜以及加热台面用

酒精擦拭消毒,并且将加热台打开预热。

7卵母细胞体外成熟

7.1准备工作

7.1.1拉制拣卵针

点燃酒精灯,拉制多根适宜的捡卵针,口径大于卵丘卵母细胞复合体,管口在火焰上烧圆钝,并使

用酒精灯火焰灭菌。

7.1.2制作成熟液滴

实验开始前制作卵母

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