治疗基因向脑内递送.ppt

*2．植入反转录病毒生产细胞（retrovirusproducercells） 反转录病毒介导的基因转移技术是目前将外源基因导入细胞的最有效的方法之一，包括重组反转录病毒载体和包装细胞两部分。优点：□对脑肿瘤细胞有特异的靶向性□导致胶质瘤退化□增加病毒的效价和作用时间第64页,共72页，星期六，2024年，5月*缺点：□宿主细胞转染率低□转染基因表达率低□大量注射可以导致中枢神经系统出血和其 他并发症的危险□反转录病毒载体有可能随机整合入宿主细 胞染色体，存在灭活抑癌基因、激活癌基 因的危险性第65页,共72页，星期六，2024年，5月*（二）经脑室脑池内递送优点：□避过血-脑屏障□病毒载体不能被脑脊液灭活且清除较慢→ 作用时间大大延长缺点：从脑脊液系统扩散进入脑实质细胞的速率慢→小部分病毒载体进入脑实质中靶细胞→治疗脑实质内肿瘤效果不佳第66页,共72页，星期六，2024年，5月*第四节开放血脑及血瘤屏障促进递送常用的开放屏障药物分两大类： 高渗溶液：甘露醇等非选择性 缓激肽及衍生物：RMP-7选择性第67页,共72页，星期六，2024年，5月*（一）高渗性血-脑屏障开放最常用甘露醇优点：1.低毒性2.易于控制开放机制：1.经颈内动脉注射甘露醇后，血管内皮细胞发 生皱缩，细胞间紧密连接分开。2.渗透压改变也可能影响第二信使系统，使 血脑屏障开放，通透性增加。第68页,共72页，星期六，2024年，5月*特点：1.开放时间：短暂且可逆的。2.无选择性：既开放血肿瘤屏障又开放正常 血脑屏障→适合于治疗播散性脑肿瘤和脑广泛性病变第69页,共72页，星期六，2024年，5月*（二）选择性开放血肿瘤屏障 缓激肽能与内皮细胞上的B2受体结合，短暂增强Ca2+内流，激活NOS，增加通透性。 B2受体在脑肿瘤细胞中的分布明显高于正常脑组织中的分布→主要促进血瘤屏障开放 RMP-7是缓激肽的一种衍生物，缓激肽代谢酶不能降解，体内浓度超过缓激肽100倍，对B2受体也有高度特异性。第70页,共72页，星期六，2024年，5月*（三）两种开放屏障方法的比较缓激肽及衍生物选择性开放血肿瘤屏障：⊕高度依赖于肿瘤类型⊕依赖于肿瘤组织的生化特性和基因表达⊕对脑肿瘤有高度特异性高渗性血脑屏障开放：⊕与肿瘤类型无关⊕开放效果由高渗溶液 作用于脑 毛细血管内 皮细胞的 时间决定⊕没有特异性⊕神经毒性大第71页,共72页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第72页,共72页，星期六，2024年，5月***SubstancesSubstancesthatcannotenterintothebrain -largeprotein -toxins -antibodies -monoamines(e.g:neurotransmitter)第32页,共72页，星期六，2024年，5月*脑室周围小器官（Circumventricularorgans,CVO）或“脑的特殊区”脑的某些部位：海绵窦、垂体后叶、正中隆起、松果体、视丘、穹隆下器官、脑极后区、脉络丛等区域缺少血-脑屏障。第33页,共72页，星期六，2024年，5月*血脑屏障的功能1.阻止外源性毒素及全身性递质进入脑内。2.避免脑组织自身神经递质的流失。3.控制葡萄糖和乳酸盐进入脑内。4.酶屏障阻止一些代谢产物进入脑内，选择性地将脑内一些有害物质泵出脑外。第34页,共72页，星期六，2024年，5月*2．血脑脊液屏障血脑脊液屏障（bloodcerebrospinalfluidbarrier） 是存在于血液与脑脊液之间的生理性屏障，主要位于脑室脉络丛处。基本结构由毛细血管内皮细胞、软脑膜和室管膜上皮三层组成。毛细血管内皮细胞软脑膜室管膜上皮：单层立方上皮，顶端连接紧密第35页,共72页，星期六，2024年，5月*Theventriclesareacomplexseriesofspacesandtunnelsthroughthecenterofthebrain.Theventriclessecretecerebrospinalfluid,whichsuspendsthebrainintheskull.CSFisproducedbystructurecalledthechoroidplexusinlateral,th