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血清乳酸脱氢酶LDH速率法测定作业指导书
1.实验原理
VITROSLDH试剂是一种干燥，多涂层的，在聚合
物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。本法测LDH
+
采用丙酮酸和NADH作底物以产生乳酸和NAD。
将一滴10ul的患者样品滴于干片上，样品就被分
布层均匀地分布并渗透到下面的试剂层。乳酸脱氢酶
+
催化丙酮酸和NADH生成乳酸和NAD。用反射强度变
化测出NADH的氧化率，再将其转化成乳酸脱氢酶的活
力。
测定方式：速率法
波长：340nm
测试时间和温度：37℃约5分钟
反应过程：
LDH
+
丙酮酸+NADH+H———————→乳酸
+NAD
2.标本：
2.1病人准备：无特殊。
2.2样品类型：血清；肝素锂/钠抗凝血浆。
2.3标本采集与处理：
Vitros测试血清和血浆的结果是一致的。而其它
一些方法由于在低速离心时血浆中血小板造成的污
染，会使血清和血浆的测试结果有明显差异。由于
VitrosLDH干片对完整血小板内的LDH不敏感，因此
对比方法的LDH结果会与Vitros肝素抗凝血浆的测试
结果不一致。样品采集后1小时内离心，然后吸出血
清。处理样品时要将其当成生物污染品。
3.标本的存放：血清、血浆室温下最多2天；不可
冷冻保存。
4.标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染
和蒸发。
5.标本拒收的标准：污染、溶血标本不能使用。
6.试验材料：
6.1测试AST所需的物品包括：Vitros化学定标物
Kit3；Vitros特制质控液；Vitros7%BSA稀释液。
强生厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了
测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
6.1.1试剂组成：干片成分：反应成份是NADH和丙酮
酸钠。其它成份有聚合物颗粒，粘合剂，缓冲剂，表
面活性剂，聚合物交叉连接剂和稳定剂。干片标记：
试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，
有效期限和储藏温度。
6.1.2试剂准备从冰箱中取出干片盒，在将干片
盒打开封装并装入仪器内的干片储藏器之前必须使其
达到室温状态18～28℃。因此从冰箱中取出的试剂盒
至少要在室温下要放置60分钟，而冷藏的试剂盒至少
要在室温下放置30分钟。去除内包装后立即将干片盒
放入仪器的储藏器中。说明：在试剂盒达到室温后的
24小时之内必须将其装入仪器中。
6.1.3试剂稳定性与贮存
未开封的干片盒：存储在-18℃或低于该范围。说
明：为了缩短预温时间或者当冷冻空间有限时，未开
o
封的试剂盒在2～8℃（36～46F）下最多可以保存4
周。
在机内干片储藏器中的干片盒：在仪器上放置时
间不能超过2周，否则要更换新试剂。当仪器关闭时
间不超过2个小时时，可将干片盒留在储藏器中。出
现以下情形要做质控检测：仪器关闭时间超过2小时；
再次装载从仪器储藏器中取出的干片盒。如果储藏正
确，VitrosLDH干片可保质到包装盒上标明的有效期
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