HuH-7细胞培养注意事项.docxVIP

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HuH-7(人肝癌细胞)培养注意事项

细胞名称:HuH-7(人肝癌细胞)

细胞别称:HuH-7;HUH-7;HuH7;Huh7;HUH7;JTC-39;JapaneseTissueCulture-39

细胞货号:SNL-085

生长特性:贴壁

培养条件:DMEM+10%FBS+1%P/S

培养环境:37℃;5%CO2;饱和湿度

细胞简介:HuH-7细胞来自患有肝癌的57岁日本男性肝脏,据报道可产甲胎蛋白、胰酶α抗体、血浆铜蓝蛋白、纤维蛋白原、纤维粘连蛋白等。

HuH-7细胞培养注意事项

1.?细胞有触角/伪足

HuH-7细胞有多个触角/伪足,属于细胞自身特性,为正常现象。

▲?HuH-7细胞有触角/伪足

2.?培养时存在黑点

HuH-7细胞中有黑色颗粒,为细胞器、细胞内囊泡或其他胞内物质,属于细胞自身特性。背景中也有少量黑色颗粒,为细胞碎片。少量碎片不影响细胞生长,若碎片较多,可以吸走培养基后用预热的PBS轻轻润洗1-2遍。

3.?控制接种密度

HuH-7细胞接种密度过低时生长速度缓慢。推荐传代比例1:2-1:3,参考传代周期3-4天。(注意T25培养瓶底面积为25cm2,10cm培养皿底面积是55cm2。一个T25传两个10cm皿约等于1:4传代,而非1:2)。

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4.?控制消化时间

HuH-7消化难度中等,使用0.25%胰酶(含EDTA)放37度培养箱消化,参考消化时间3-4min。因不同实验室使用的胰酶品牌不同,需根据实际情况调整时间。实际操作中,消化到细胞部分自然滑落时再终止消化。变圆但未脱落时需要继续消化,确保细胞是被胰酶消化下来而不是被强行吹下的,避免细胞损伤。

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