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H9c2(2-1)(大鼠心肌细胞)培养注意事项
细胞名称:H9c2(2-1)(大鼠心肌细胞)
细胞别称:H9c2(2-1);H9c2;H9C2
细胞货号:SNL-029
生长特性:贴壁
培养条件:DMEM+10%FBS+1%P/S
培养环境:37℃;5%CO2;饱和湿度
细胞简介:H9c2(2-1)细胞是一株由Kimes·B和Brandt·B从BD1X大鼠胚胎心脏组织的原始克隆细胞株中经过亚克隆得到的细胞株。H9c2(2-1)细胞表现出许多骨骼肌的特性,H9c2(2-1)细胞中的成肌细胞能融合形成多核的肌管,并对乙酰胆碱的刺激发生反应。如果培养基中的血清浓度下降到1%,H9c2(2-1)细胞融合发生得很快。H9c2(2-1)细胞表达肌激酶、肌酸激酶、肌球蛋白,可用于心血管疾病研究,也是一种合适的转染宿主。
▲细胞正常生长形态照片
H9c2(2-1)细胞培养注意事项
1.?控制接种密度
H9c2(2-1)细胞接种密度过低时生长速度缓慢,推荐传代比例1:2-1:3。(注意T25培养瓶底面积为25cm2,10cm培养皿底面积是55cm2,一个T25传两个10cm皿约等于1:4传代,而非1:2)。
同时注意密度不要过高,培养时应加入足量的培养基,避免培养基营养快速耗尽导致细胞脱落或状态变差。培养基变黄后及时换液,细胞密度到达80%后及时传代。
2.?贴壁较弱
该细胞贴壁比较弱,消化时间偏短,注意控制消化时间。(消化步骤见下文传代攻略)
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另外,在遇到快递运输震荡、低温、室温静置太长时间、添加的培养基或其他试剂过冷等情况时可能会出现细胞回缩变粗变短甚至脱落的现象,及时放回培养箱静置培养后可恢复正常。平时注意传代换液前将培养基、PBS等试剂充分预热,不要把细胞放在室温太长时间。
3.?少量圆形
H9c2(2-1)细胞培养时存在少量圆形贴壁细胞,为正常的细胞增殖现象。细胞处于不同增殖周期,具体形态会有差异,例如分裂期细胞通常会变小变立体呈圆形甚至脱落,而分裂间期细胞会铺展比较开,这些都是正常增殖现象。
▲存在少量圆形细胞是正常现象
4.?对血清要求高
建议使用高品质的、并确认过培养效果的专用培养基及血清,血清品质对该细胞生长影响甚大。
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