副结核分枝杆菌ag85b基因在大肠杆菌中的表达.docx

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副结核分枝杆菌ag85b基因在大肠杆菌中的表达摘要

目的:为研制牛结核病新型疫苗,构建副结核分枝杆菌ag85b基因原核表达质粒,并在大肠杆菌中获得表达的

Ag85B蛋白。

方法:将重组克隆质粒pMD-ag85b中的副结核分枝杆菌ag85b基因亚克隆到pET28a(+)表达载体中,构建重组质粒pET28a-ag85b,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。IPTG诱导表达,通过SDS电泳和Westernblot分析鉴定Ag85B蛋白的表达及其抗原活性。

结果:成功地副结核杆菌ag85b的基因,构建了ag85b的原核表达载体,并获得了能高表达副结核杆菌Ag85B成熟蛋白的工程菌

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