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多克隆抗体制备练习题

一、选择题

A.盐析法B.硫酸铵盐析法C.酶解法D.凝胶过滤法

A.腹腔注射B.静脉注射C.肌肉注射D.皮内注射

A.小鼠脾细胞B.小鼠骨髓瘤细胞C.人外周血淋巴细胞D.大

鼠腹水细胞

4.下列关于佐剂的说法,错误的是?

A.佐剂可以增强免疫原性B.佐剂可以减少免疫次数

C.佐剂可以提高抗体产量D.佐剂可以改变抗体类型

A.免疫动物B.细胞融合C.亲和层析D.抗体纯化

二、填空题

1.在多克隆抗体制备过程中,常用的免疫原为______、______和

______等。

2.抗体纯化方法包括______、______、______等。

3.在细胞融合过程中,常用的融合剂为______和______。

4.抗体效价的测定方法有______、______和______等。

5.多克隆抗体的优点包括______、______和______等。

三、判断题

1.多克隆抗体只能识别一种抗原表位。()

2.免疫动物时,抗原剂量越大,抗体产量越高。()

3.细胞融合后,可以通过选择性培养基筛选出杂交瘤细胞。()

4.抗体纯化过程中,亲和层析法可以获得高纯度的抗体。()

5.多克隆抗体在临床诊断中的应用比单克隆抗体更为广泛。()

四、简答题

1.简述多克隆抗体制备的基本流程。

2.试述杂交瘤技术的原理。

3.请列举三种常用的抗体纯化方法,并简要说明其原理。

4.影响多克隆抗体效价的因素有哪些?

5.如何对多克隆抗体进行保存?

五、案例分析题

1.病毒名称:HIV1

2.免疫动物:新西兰大白兔

3.需要获得的抗体类型:IgG

4.抗体应用:ELISA检测

六、计算题

1.若一只新西兰大白兔每次免疫需要100μg的抗原,共免疫4

次,每次间隔两周。已知抗原蛋白的纯度为80%,计算总共需要的抗原

蛋白质量。

2.在一次抗体纯化过程中,通过亲和层析柱得到了5mL的抗体洗

脱液,测得其蛋白浓度为10mg/mL。若该抗体的比活性为1:100(即

1mg抗体可以结合100mg抗原),计算该抗体洗脱液中的抗体总量。

七、实验操作题

1.请简述如何通过硫酸铵盐析法初步纯化抗血清。

2.描述杂交瘤细胞筛选过程中,如何使用HAT选择性培养基。

3.请写出从细胞培养上清中提取抗体的步骤。

八、名词解释

1.抗原

2.抗体

3.杂交瘤细胞

4.亲和层析

5.ELISA

九、论述题

1.论述多克隆抗体在生物医学研究中的应用。

2.分析多克隆抗体与单克隆抗体在制备和应用上的优缺点。

3.讨论影响免疫动物产生抗体的因素,并提出相应的对策。

十、设计题

1.设计一个实验方案,用于检测小鼠体内多克隆抗体的产生情况。

2.假设你需要制备一种针对特定肿瘤标志物的多克隆抗体,请设

计一个完整的制备流程,包括免疫原的选择、免疫动物、抗体提取和

纯化等步骤。

答案

一、选择题

1.A.盐析法

2.B.静脉注射

3.C.人外周血淋巴细胞

4.D.佐剂可以改变抗体类型

5.C.亲和层析

二、填空题

1.蛋白质、多糖、多肽

2.盐析法、凝胶过滤、亲和层析

3.聚乙二醇(PEG)、电融合

4.ELISA、放射免疫测定、免疫荧光测定

5.抗原表位识别广泛、生产成

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