2025年高考生物人教版课后课时规范练52　基因工程的基本工具与操作程序(带解析答案).docx

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课时规范练52基因工程的基本工具与操作程序

必备知识基础练

考点一重组DNA技术的基本工具

1.培育转基因抗虫棉的过程中需要使用多种酶,下列相关叙述错误的是()

A.限制酶能识别特定的碱基序列,并使特定位点的磷酸二酯键断开

B.E.coliDNA连接酶只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来

C.RNA聚合酶识别并结合到启动子上才能驱动基因转录出mRNA

D.TaqDNA聚合酶在PCR过程中只能沿引物的5端延伸DNA子链

2.(2025·广东普宁期中)下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述,正确的是()

A.用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口,有两个磷酸二酯键被断开

B.限制酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的概率就越大

C.序列—CATG↓—和—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端碱基数不同

D.T4DNA连接酶和E.coliDNA连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接

3.(2025·北京海淀模拟)科研人员利用农杆菌转化法将抗病毒蛋白基因C导入番木瓜,培育出转基因抗病毒番木瓜,Ti质粒结构模式如图所示。下列叙述正确的是()

A.农杆菌的T-DNA与番木瓜基因发生重组

B.构建重组质粒需要限制酶和DNA聚合酶

C.含重组Ti质粒的农杆菌具有四环素抗性

D.转基因抗病番木瓜不具有卡那霉素抗性

考点二基因工程的基本操作程序

4.(2025·山西大同质检)为了增加菊花花色类型,研究者从其他植物中克隆出花色基因C(如图1),拟将其与质粒(图2)重组,再借助农杆菌导入菊花中。

下列操作与实验目的不符的是()

A.用限制性内切核酸酶EcoRⅠ和DNA连接酶构建重组质粒

B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织,将C基因导入细胞

C.在培养基中添加卡那霉素,筛选被转化的菊花细胞

D.用PCR技术检测C基因是否整合到菊花染色体上

5.(2025·福建龙岩模拟)为提高红豆杉细胞培养物中紫杉醇的产量,研究人员构建紫杉醇合成关键酶基因(Bapt)的超表达载体,并将其导入红豆杉细胞,具体流程如图。下列相关说法不正确的是()

A.p1301载体上可能含有增强Bapt基因表达的序列

B.超表达载体中应含有潮霉素抗性基因作为标记基因

C.可使用Bapt基因制成的探针检测过程⑤是否成功

D.工厂化生产紫杉醇需将改造后的红豆杉细胞培养至愈伤组织

6.(2025·浙江嘉兴联考)MAP30蛋白存在于苦瓜的果实和种子中。实验表明MAP30蛋白具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒等功能,近年来引起了人们的广泛关注。MAP30蛋白基因可作为基因工程中的目的基因,下列叙述错误的是()

A.可从苦瓜果实或种子中提取RNA,经逆转录法获取目的基因

B.对PCR扩增后的产物,一般需要通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定

C.检测MAP30蛋白基因是否成功表达,可用抗原—抗体杂交技术

D.直接将MAP30蛋白基因导入马铃薯受体细胞,可获得转基因幼苗

7.GFP是水母体内存在的能发绿色荧光的一种蛋白。科研人员以GFP基因为材料,利用基因工程技术获得了能发其他颜色荧光的蛋白,丰富了荧光蛋白的颜色种类。回答下列问题。

(1)构建突变基因文库。科研人员将GFP基因的不同突变基因分别插入载体,并转入大肠杆菌制备出GFP基因的突变基因文库。通常,基因文库是指。?

(2)构建目的基因表达载体。科研人员从构建的GFP突变基因文库中提取目的基因(均为突变基因)构建表达载体,其模式图如下所示(箭头为GFP突变基因的转录方向)。图中①为;②为,其作用是;图中氨苄青霉素抗性基因是一种标记基因,其作用是。?

(3)目的基因的表达。科研人员将构建好的表达载体导入大肠杆菌中进行表达,发现大肠杆菌有的发绿色荧光,有的发黄色荧光,有的不发荧光。请从密码子特点的角度分析,发绿色荧光的可能原因是(答出1点即可)。?

(4)新蛋白与突变基因的关联性分析。将上述发黄色荧光的大肠杆菌分离纯化后,对其所含的GFP突变基因进行测序,发现其碱基序列与GFP基因的不同,将该GFP突变基因命名为YFP基因(黄色荧光蛋白基因)。若要通过基因工程的方法探究YFP基因能否在真核细胞中表达,实验思路是??。?

考点三实验:DNA的粗提取与鉴定、DNA片段的扩增及电泳鉴定

8.(2025·江苏苏州质检)下列以洋葱为实验材料进行“DNA的粗提取与鉴定实验”的叙述,正确的是()

A.洋葱研磨液需要用滤纸过滤,以