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班级：植物092姓名：徐炜佳学号：0901080223
愈伤组织的诱导和培养
一、实验目的及意义
植物愈伤组织的诱导和培养在植物科学的基础研究和应用研究中都有重要的意义。通过
本次实验，可以初步掌握植物外植体材料消毒、接种的无菌操作技术，愈伤组织的诱导方法
和愈伤组织继代培养的方法。
二、实验原理
植物组织与细胞培养是应用无菌操作的方法培养离体的植物器官、组织或细胞的过程。
如果组织培养使用的植物材料是带菌的，在接种前就必须选择适当的消毒剂对植物外植体进
行表面消毒，获得无菌材料进行组织培养，这是取得植物组织培养，成功的基本前提和重要
保证。由于植物细胞具有全能性，外植体在合适的培养基上通过脱分化，形成一种能迅速增
殖的无特定结构和功能的细胞团——愈伤组织（callus）。植物生长调节剂如2,4-二氯苯氧乙
酸（2,4-D）等是诱导外植体形成遇上组织的重要因素。
三、实验仪器与药品
超净工作台，酒精灯，镊子，剪刀，解剖刀，75%乙醇，酒精消毒棉
材料：烟草无菌苗，甘薯无菌苗
四、实验步骤
1.按下表分别配制培养基
MS1-1（接种材料：烟草）
成分母液倍数或浓度配制1.0L培养基所配制培养基所需母
（mg/ml）需量液量（ml）或直接称
量量（g）
大量元素20倍液50ml25ml
微量元素200倍液5ml2.5ml
铁盐200倍液5ml2.5ml
有机物质200倍液5ml2.5ml
蔗糖30g15g
NAA1.0mg/ml
KT1.0mg/ml0.1ml0.05ml
6-BA1.0mg/ml
2,4-D1.0mg/ml1.0ml0.5ml
琼脂8g4g
pH值5.8
MS1-2（接种材料：烟草）
成分母液倍数或浓度配制1.0L培养基所配制培养基所需母
（mg/ml）需量液量（ml）或直接称
量量（g）
大量元素20倍液50ml25ml
微量元素200倍液5ml2.5ml
铁盐200倍液5ml2.5ml
有机物质200倍液5ml2.5ml
蔗糖30g15g
NAA1.0mg/ml
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