离体蛙类心脏灌注及药物的影响.pptVIP

11111第六次实验离体蛙类心脏灌注及药物的影响主要内容11实验原理2注意事项3实验后处理4实验步骤5实验目的制备离体蛙心实验步骤：1结扎右主动脉，结扎静脉（避开静脉窦）左主动脉处结扎、切口、插管、固定、剪开胸腔和心包膜，辨认蛙心结构剪断，蛙心离体取蛙，破坏脑和脊髓连接实验装置01实验装置参数设置02给予处理因素03离子影响：0.65%NaCl；2%CaCl2；1%KCl递质影响：1:10000NA；1:100000Ach；2000阿托品+1:100000Ach药物影响：0.025%毒毛旋花子甙K温度影响：4℃林格液酸碱影响：2.5%NaHCO3；3%乳酸+2.5%NaHCO3记录1记录正常收缩曲线01幅度：心脏收缩的强弱02疏密度：心搏频率03规律性：心搏的节律性04基线：心室舒张的程度05注意事项：1吸管要分开使用。同的高度(负荷相同)。3.每次换液时蛙心内的液面应保持大致相01制备离体蛙心标本不要伤及静脉窦；插管插入左心室后要及时将血液吸出，以防堵塞。2.保持蛙心的活性，注意滴加林格液。02加药时先加1滴，出现效应后应及时更换为林格液。每次施加处理因素前应先记录一端正常曲线，做好标记，要有恢复曲线。注意保护换能器，不要过度牵拉，液体不要滴在上面。截取各种处理因素具有代表性的蛙心收缩曲线，制成单页图打印出来。01分析各处理因素对蛙心收缩曲线影响及其原理，写出实验报告。01实验结果处理011等量0.65%NaCl,收缩力减弱，心率加快Ca2+减少，收缩力减弱K+减少，膜对K+通透性降低，静息电位绝0.65%NaCl渗透压与林格液相同但缺K+,Ca2+K+外流减少，Na+内流增加，4期If增强对值减少胞外Ca2+浓度升高，内流增多，心肌收缩力增加，幅度增大；但胞内Ca2+过多，肌钙蛋白与Ca2+结合不能解离发生，导致心肌舒张不完全，严重者可发生钙僵，图中表现为收缩曲线上移。Ca2+浓度升高，抑制Na+内流2%CaCl2收缩力增加，心率减慢010302胞外K+浓度升高，Ca2+内流减少（竞争）胞外K+浓度升高，静息电位绝对值减少，低于-55~-60mV时，快Na＋通透失活，兴奋性下降，心率减慢，甚至停止在舒张期011%KCl，01收缩力减弱，心率减慢011NA与心肌β受体结合后，激活AC,Ca2+通道开放增加，正性变力、变时、变传导3收缩力增加，心率加快2NA030201Ach与心肌细胞膜上M-R结合，抑制AC，抑制钙通道，同时激活GK蛋白，K+外流增加，负性变力、变时、变传导Ach收缩力减弱，心率减慢阿托品+Ach，无明显变化阿托品为M胆碱受体拮抗剂，但离体蛙心无神经支配，无ACh释放，加入阿托品后无明显作用；再加入Ach，由于阿托品已将M胆碱受体阻断，故Ach无作用。抑制Na+-K+－ATP酶使细胞内Na+量升高，K+下降，胞内Na+升高，可促进细胞内外Na+-Ca2+交换,使细胞内Ca2+增多，从而加强心肌细胞收缩力。（毒K的作用有赖于胞外Ca2+的存在）7.毒K收缩力增加4℃冷林格液收缩力减弱，心率减慢温度过低时，肌凝蛋白头部ATP酶活性降低酶活性降低，代谢水平降低，各离子通道蛋白活性降低，心脏收缩活动减弱，心率减慢。122.5%NaHCO3收缩力减弱NaHCO3可使细胞内H+外逸，与胞外K+进行H+-K+交换，K+外流减少，细胞的膜电位减小甚至兴奋性完全丧失。另外，NaHCO3也使林格液中游离的Ca2+浓度降低（如形成CaCO3沉淀），内流Ca2+减少，心肌收缩力降低。0102乳酸收缩力降低，再加入NaHCO3,逐渐恢复H+可竞争性抑制Ca2+与肌钙蛋白结合亚单位的结合，使肌凝球蛋白ATP酶活性降低;H+使钙从肌浆网释放量减少,抑制Ca2+释放;胞外H+升高还能降低钙通道的活性，使Ca2+内流降低，心脏的收缩活动减弱。加入NaHCO3后中和酸，心脏活性逐渐恢复。01021111