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紫杉醇前体依赖于MEP途径合成的分子调控机理Ⅱ

—TcMCT和TcMCS基因的克隆与功能研究;目录;南方红豆杉的概况;为什么要研究红豆杉;紫杉醇一种高效的抗癌药物;;基于RACE技术的同源性克隆方法克隆了南方红豆杉中的两个基因（MCT和MCS）

TcMCT和TcMCS基因的功能验证

TcMCT基因的原核表达和酶活测定

TcMCT基因的组织差异表达;技术路线;A;TcMCT全长cDNA序列及编码的氨基酸序列;h表示α-螺旋，e表示β-片层，t表示β-转角，c表示随意卷曲；

30.13%的α-螺旋、21.15%β-片层、8.97%β-转角和39.74%随意卷曲构成。;;细菌来源MCT用○表示；植物来源用三角表示，其中被子植物用▲表示，裸子植物用△表示。分支上的数字为Bootstrap值(重复1000次)。;TcMCT三级结构预测;TcMCT基因的功能验证;TcMCT重组蛋白的诱导;过Ni-NTA亲和树脂纯化TcMCT重组蛋白的的SDS;通过分子筛进一步纯化TcMCT蛋白;TcMCT重组蛋白含量测定;TcMCT重组蛋白的酶活性测定;TcMCT重组蛋白在25℃下的CD图谱;;;;D;TcMCS全长cDNA序列的分析;TcMCS全长cDNA序列及编码的氨基酸序列;TcMCS蛋白质的二级结构预测;“★”表示底物结合的活性位点;TcMCS系统进化树;TcMCS蛋白质三级结构预测;TcMCS基因的功能验证;结论与展望;（5）后续工作：

Southernblot分析TcMCT和TcMCS基因在南方红豆杉基因组中拷贝数；HPLC-ELSD测定南方红豆杉各组织中紫杉醇的含量，进一步分析目的基因的表达和紫杉醇生物合成的关系；阐明基因在紫杉醇合成中的作用。;致谢;