从土壤中分离产淀粉酶的芽孢杆菌实验方案范文.pdf

士不可以不弘毅，任重而道远。仁以为己任，不亦重乎?死而后已，不亦远乎?——《论语》

从土壤中分离产淀粉酶的芽孢杆菌实验方案范文

土壤中产淀粉酶芽胞杆菌的筛选及其淀粉酶活力的测定设计性实验方

案

一、综述：

淀粉酶是淀粉降解酶。它们广泛存在于微生物、植物和动物体中。它

们将淀粉及相关的聚合物分解为带有具体淀粉分解酶特征的产品。淀粉酶

广泛存在于动植物和微生物中,是最早用于工业生产并且迄今仍是用途最

广、产量最大的酶制剂产品之一。淀粉酶种类繁多,特点各异,可应用于造

纸、印染、酿造、果汁和食品加工、医药、洗涤剂、工业副产品及废料的

处理、青贮饲料及微生态制剂]等多种领域。在酿造发酵工业如酒精生产、

啤酒制造、发酵原料液化及糖化工艺过程中均有重要价值,如添加淀粉酶

分布非常广泛，是人们经常研

【】

究的一种酶。从纺织工业到废水处理，这些酶都有不同规模的应用1。

常见产淀粉酶的主要为芽孢杆菌属。其中的常见产淀粉酶的芽孢杆菌

菌种有：地衣芽

【】【】

孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌2、凝结芽孢

3。由于芽孢杆菌属是一类好氧或兼性厌氧、产生抗逆性内生抱子的杆状

细菌，许多为腐生菌，主要分布于土壤

【】

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和植物体表面及水体中4。所以此次实验从土壤中分离产淀粉酶的芽

孢杆菌。

二、实验目的要求

1．了解生物分离提纯的原理和方法技术2．掌握从土壤中筛选产淀

粉酶菌株的原理和方法

3.掌握微生物摇瓶培养方法及淀粉酶活力测定的原理和方法4.培养

学生的综合应用微生物实验方法的能力

5.培养学生自行设计实验流程、综合分析问题解决问题和判断实验结

果的能力。

三、实验原理

自然界中，土壤是微生物生活最适宜的环境。土壤具有微生物进行生

长繁殖和生命活动中所需的各种条件。

土壤中微生物的数量因土壤类型、季节、土层深度与层次等不同而异。

一般地说，在土壤表面，由于日光照射及干燥等因素的影响，微生物不易

生存，离地表10cm～30cm的

【】

土层中菌数最多，随土层加深，菌的数量减少5。

从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微

生物分离与纯化。平板分离法普遍用于微生物的分离与纯化。其基本原理

是选择适合与待分离微生物的生长条件，如营养成分、酸碱度、温度和氧

等要求，或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其他微生物

生长的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。

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值得指出的是，从微生物群体中经分离生长在平板上的单个菌落并不

一定保证是纯培养。因此，纯培养的确定除观察其菌落特征外，还要结合

显微镜检测个体形态特征后才能确定，有些微生物的纯培养要经过一系列

分离与纯化过程和多种特征鉴定才能得到。

芽孢杆菌属的共同特征是：革兰氏阳性；接触酶阳性；水解淀粉；VP

试验阳性；不产生吲哚；苯甲氨酸不脱氨；分解酪素；不分解酪氨酸；不

产生二羟丙酮；营养体的最高生长温度大约从25℃到75℃以上；最低生

长温度大约5℃到45℃；生长最低pH值，从7.5—8到2左右；耐盐范围

从低于2%的NaCl到25%NaCl；营养明胶（22℃）7天内液化1厘米或1

厘米以上。枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌在糖发酵试验用阿拉伯糖，木糖

和甘露糖代

替葡萄糖可产酸；作为营养生长的最低限培养基是无维生素的，但含

有葡萄糖、柠檬酸盐和

【】。