PCR-SSCP简介及应用_原创精品文档.pdfVIP

学而不知道，与不学同；知而不能行，与不知同。——黄睎

PCR–SSCP技术综述

摘要：聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)是基于PCR的单链构象多态

性分子标记技术。PCR-SSCP作为检测基因突变的方法，自创立以来，经历了自

身发展和完善的过程。刚建立时是将同位素掺入PCR扩增物中，通过放射自显

影来显示结果，这给该技术的推广造成一定的困难。随着DNA银染方法与

PCR-SSCP结合，尤其是直接溴乙锭染色方法的应用，使得该方法大大简化，操

作更为简单，局限性较小，实验条件要求不高，适合一般临床实验室使用，具有

简便、快速、灵敏的特点。不但被用于检测基因点突变和短序列的缺失和插入，

而且还可用于动物育种，微生物，寄生虫研究的多个领域。由于SSCP的突出的

优点，近几年被大量地应用。文章介绍PCR-SSCP的原理和方法，优点与缺点，

技术的优化和应用级展望。

关键词：PCR-SSCP；原理；方法；优缺点；展望

Abstract：Polymerasechainreaction-singlestrandconformationpolymorphism

(PCR-SSCP)isaPCR-basedsingle-strandconformationpolymorphismmolecular

markers.PCR-SSCPasamethodtodetectgenemutations,sinceitsinception,has

experienceditsowndevelopmentandimprovementprocess.Whenistheisotope

incorporationnewlycreatedobjectsinthePCRamplification,byautoradiographyto

showresults,whichmaycausesomedifficultytothepromotionofthetechnology.

SilverstainingDNAwithPCR-SSCPmethodbinding,especiallyasadirectmethod

ofstainingwithethidiumbromidesothatthesimplifiedmethod,theoperationis

simpler,lesslimitations,theexperimentalconditionsdonotaskforgeneralclinical

laboratoryuse,withsimple,rapid,sensitivefeatures.Notonlyisusedfordetectionof

genedeletionsandpointmutationsandinsertionofshortsequences,butalsofor

animalbreeding,microbes,parasitesresearchinmanyfields.Astheoutstanding

advantagesofSSCP,areextensivelyusedinrecentyears.Thispaperintroducesthe

principlesandmethodsofPCR-SSCP,advantagesanddisadvant