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天行健，君子以自强不息。地势坤，君子以厚德载物。——《周易》

分子诊断复习题旧

分子诊断学复习题

一、概念

1.分子诊断学:分子诊断学是以分子生物学理论为基础，利用基因

和蛋白质分析技术和方

法来研究人体内源性或外源性生物大分子体系的存在、结构或表

达调控的变化，为疾病的监测、诊断、疗效判断和预后评估、个体化

治疗等提供信息和决策依据的一门科学。

2.酶联免疫吸附测定（ELISA）:是以抗原或抗体的固相化及抗原

或抗体的酶标记为基础，

反应完成后加入酶反应底物，底物被酶催化成为有色产物，产物

的量与标本中受检物质的量直接相关，由此进行定性或定量分析。

3.时间分辨荧光免疫分析技术（TRFIA）：是用镧系稀土元素螯合

物标记抗体或抗原，检

测标本中相应的抗原或抗体，用时间分辨荧光免疫分析检测仪测

定反应产物中的荧光强度。根据产物荧光强度和相对荧光强度的比值，

判断反应体系中分析物的浓度，从而达到定量分析。而时间分辨与酶

免、放免相比，因为在激发光照射后，稀土元素激发光的最大吸收波

与发射光的最大发射波长之间stokes位移最大；发光的半衰期长

（10-2000us），避免了杂光的影响；激发光谱宽，发射光谱窄，不

必担心光谱重叠。4.金标免疫测定:以微孔滤膜为载体，包被已知抗原

或抗体，加入待检标本后，经滤膜的

毛细管作用使标本中的抗体或抗原与膜上包被的抗原或抗体结合，

再通过胶体金或超顺磁性纳米微粒结合物达到检测目的。

5.PCR-RFLP(限制性片段长度多态性):聚合酶链式反应—限制性片

段长度多态

（PCR—RFLP）分析技术是在PCR技术基础上发展起来的。

DNA碱基置换正好发生在某种限制性内切酶识别位点上，使酶切位点

增加或者消失，利用这一酶切性质的改变，PCR特异扩增包含碱基置

天行健，君子以自强不息。地势坤，君子以厚德载物。——《周易》

换的这段DNA，经某一限制酶切割，再利用琼脂糖凝胶电泳分离酶切

产物，与正常比较来确定是否变异。应用PCR—RFLP，可检测某一致

病基因已知的点突变，进行直接基因诊断，也可以此为遗传标记进行

连锁分析进行间接基因诊断。

用特定的限制性核酸内切酶对目的DNA分子进行消化，得到的酶

切片断其大小和数量可以在一定程度上反映出目的DNA分子的序列信

息。

诊断遗传病和传染病病原体基因分型

6.PCR-SSCP(单链构象多态性):聚合酶链反应-单链构象多态性分

析，是近年来发展起来

的一种基因分析方法。PCR-SSCP分析技术是一种DNA单链凝胶

电泳技术，它根据形成不同构象的等长DNA单链在中性聚丙烯酰胺凝

胶中的电泳迁移率变化来检测基因变异。不同构象的单链DNA的迁移

率不同，相同长度的DNA单链由于其碱基顺序不同而不同的构象，

在电泳时表现出不同的迁移率。可以检测出突变位点的存在。

用于分析癌基因和等位基因的突变，检测遗传病、免疫性疾病、

传染性疾病的基因突变。

7.Southern-blot:将待检测的DNA分子用/不用限制性内切酶消化

后，通过琼脂糖凝胶电

泳进行分离，继而将其变性并按