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大肠杆菌灭活苗的制备实验报告

实验目的：

1.熟悉大肠杆菌培养和灭活方法；

2.学习掌握灭活苗制备的实验技术。

实验原理：

实验步骤：

1.大肠杆菌培养：取一块LB平板，用灭菌铁环沾取一点大肠杆菌单

克隆菌株，点接在含有LB培养基的离心管中。将培养管放入恒温摇床中，

以37℃、200rpm的条件下培养12-16小时。

2.培养基的制备：将1LLB培养基溶解于适量的蒸馏水中，加入适量

的琼脂糖。将混合溶液调节至pH7.0左右，然后将溶液加热至溶解琼脂糖

完全。将溶液分装入离心管中，每管倒满2/3，然后将倒置固化。

3.灭活实验：将大肠杆菌培养物离心，去除上清液，然后加入对应的

化学灭活剂。常用的化学灭活剂有福尔马林、甲醛以及石灰。选择合适的

灭活剂和浓度，将大肠杆菌悬液与灭活剂混合，混匀后放置室温下静置一

段时间。

4.灭活后的处理：灭活结束后，将灭活后的大肠杆菌培养物通过离心

使菌体沉淀，去除上清液。然后用生理盐水洗涤培养物，再次离心使菌体

沉淀。重复洗涤步骤，以去除残留的灭活剂。

5.疫苗的制备：将洗涤后的菌体沉淀用生理盐水稀释至适宜浓度，然

后将稀释液分装入疫苗瓶中。

6.储存条件：将制备好的大肠杆菌灭活苗储存在2-8℃的冰箱内。储

存期一般不超过3个月。

实验结果：

制备好的大肠杆菌灭活苗应该呈现透明无菌液体。

实验注意事项：

1.在培养大肠杆菌时要注意无菌操作，避免外源菌污染。

2.在灭活过程中，要控制好灭活剂的浓度和作用时间，避免对菌体产

生过大的损伤。

3.制备疫苗后要储存于低温冰箱中，避免菌体的破坏和变化。

4.实验过程中要注意个人防护，避免与化学灭活剂直接接触。

实验总结：

通过本次实验，我们成功地制备了大肠杆菌灭活苗。制备疫苗的过程

需要准确掌握各个步骤和相关技术，以确保疫苗的质量和效果。此外，实

验中还需要注意无菌操作、化学灭活剂的使用和个人防护等安全问题。通

过这次实验，我们不仅熟悉了大肠杆菌的培养和灭活方法，还对灭活疫苗

的制备过程有了更深入的了解。这对于我们今后从事相关疫苗研究和制备

工作有着重要的意义。