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模块二水质分析基础2
生活饮用水微生物指标;模块二水质分析基础2;饮用水卫生标准;目的与要求;饮用水卫生标准;一、生活饮用水中微生物指标;水质非常规指标及限值;一、生活饮用水中微生物指标;水体的微生物污染问题
在实际工作中,对水质卫生质量的评价和控制,无法对水体中各种可能存在的致病微生物一一进行检测。
一般选择有代表性的一种或一类微生物作为指示菌,通过对指示菌的检测,来了解水体是否受到过的微生物污染,是否有肠道病原微生物存在的可能。;一、生活饮用水中微生物指标;(2)总大肠菌群(coliformbacteria)
是指一群需氧及兼性厌氧的,37℃生长时能使乳糖发酵
在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌
检测意义
作为粪便污染的指标
水样总大肠菌群数的含量,表明水被粪便污染程度
间接地表明有肠道致病菌存在的可能;大肠杆菌;(3)耐热大肠菌群(thermotoletantColiformOrganisms)
在44~44.5℃下具有与大肠菌群相同发酵及生物化学性能的菌群。
注意:我国习惯上把耐热大肠菌群称为“粪大肠菌群”;大肠杆菌的生物学特性——培养特性;大肠杆菌的生物学特性——在普通营养琼脂上有3中菌落形态:;总大肠菌群、耐热大肠菌群和大肠埃希氏菌比较;微生物指标
及测定;;水样的采集
所采集的样品具有代表性。
采样容器:选择无菌硼硅玻璃瓶和聚乙烯塑料瓶。
不能是新的污染源;不吸收或吸附某些待测组分;不与待测组分发生反应。
保证从采样到分析期间,样品各组分的浓度不发生改变。
采样要求:微生物样品必须按一般无菌操作的基本要求采集,并保证在运送、贮存过程中不受污染。;自来水水样
先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌,再开放水龙头使水流5min(经常用水的水龙头放水1~3min)后,采集水样于无菌玻璃瓶,约占瓶容量80%,以便摇匀水样。
水源水水样
选有代表性的地点及可疑地方,一般距水面下10~15cm采样。采样后,将瓶塞盖好,再从水中取出。;注意事项
严格无菌操作。
做好标记:采得水样后应立即记录水样名称、地点、时间等内容。
从速送检:水样从采集到检验不应超过2h
??4℃下保存不应超过24h。;微生物指标检验准备;微生物指标检验方法;1.菌落总数的测定;1.菌落总数平板计数法;1.菌落总数平板计数法;1.菌落总数平板计数法;[水源水细菌总数检测方法]:
(1)器材与试剂的准备
无菌1ml吸管6支/组,无菌10ml吸管1支/组。
无菌平皿9个/组,营养琼脂。
90ml灭菌盐水1瓶(内置适量玻璃珠),9ml灭菌盐水管3支。;[水源水细菌总数检测方法]
(2)稀释水样
无菌吸10ml混匀水样注入90ml灭菌水瓶中,混匀成1:10水样。
取1:10水样1ml注入9ml灭菌试管中混匀成1:100水样。
同法稀释成1:1000,1:10000水样。
(3)倾注培养
用1ml无菌吸管吸取2~3个适当浓度的稀释液1ml,分别注入无菌平皿中
每个稀释度应同时做2个平皿,另取一平皿作空白对照。
再做倾注培养(方法同饮用水)。
(4)菌落计数:方法同饮用水。
;1.菌落总数测定;[结果分析与报告]
计算不同稀释度的平均菌落数:
稀释度的选择和菌落总数报告方式:
首先选择平均菌落在30~300之间者进行计算。
计算方法和报告方式如表1所示。;表1稀释度选择及菌落总数报告方式;水质被污染的程度判定
;[菌落总数测定的注意事项]
菌落总数测定中,应选择合适的稀释度进行。
(生活饮用水,国家标准规定每毫升不得超过100个,因此可以直接吸取1毫升到平板进行培养)
各稀释管、相应平皿做好标记。包括:水样名称、稀释度、时间、小组。
严格无菌操作。进行水样稀释时,每一稀释度均需更换吸管。
倾注时,要注意营养琼脂的温度。
倾入琼脂后要混匀,待琼脂凝固后倒置培养。;总大肠菌群指一群在37℃培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
培养基:乳糖蛋白胨培养液、二倍浓缩乳糖蛋白胨培养液、伊红美蓝培养基
设备:显微镜;初步发酵法结果;2.总大肠菌群的测定—多管发酵法;2.总大肠菌群的测定—多管发酵法;产气;2.总大肠菌群的测定—滤膜法;2.总大肠菌群的测定—酶底物法;2.总大肠菌群的测定;
培养温度提高到44~44.5℃,在此条件下仍能生长和发酵乳糖的菌群。
埃希氏菌属:粪源特异性
克
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