发酵法生产L-苯丙氨酸的研究进展 王凯 .pdfVIP

发酵法生产L-苯丙氨酸的研究进展

摘要：L-苯丙氨酸(L-phenylalanine,L-Phe)是一种广泛应用于食品、饲料添加剂以及医药等

领域中的必需氨基酸，主要的工业生产方法为原料廉价易得，环境污染小的微生物发酵法。

综述了国内外发酵法生产L-苯丙氨酸的关键技术和策略以及最新研究进展情况。

关键词：L-苯丙氨酸；发酵法；基因工程技术；工艺优化

1.L-苯丙氨酸的性质和用途

苯丙氨酸(Phenylalanine)又称α-氨基化肉桂酸，分子式CHON，分子量165.19，属于

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带苯环的芳香族氨基酸。最早由Schulze在1897年从羽扇豆幼苗中发现和分离，接着Fischer

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于20世纪初由动物性蛋白质中成功分离得到。其光学异构体一共有三种，分别为L-型，

D-型及外消旋D,L-型，其中的L-型具有生物活性，呈白色或无色的结晶粉末状，有苦味，常

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温下溶解度较低，为29.6g/L，并难溶于甲醇和乙醇等有机溶剂。

L-苯丙氨酸在自然界广泛存在，但其含量都不高，在卵、乳和动物蛋白中，含量5~6%，

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在植物性蛋白质中含量占1%，石油蛋白中占到8%，单细胞蛋白中占3~5%。L-Phe还主要

存在于纤维蛋白、蛋白及血红蛋白中，影响甲状腺激素和毛发、皮肤的黑色素，还参与消除

一些内脏的功能的损耗。它是人体必需但自身无法合成的八种必需氨基酸之一，L-Phe的人

体代谢障碍是一些先天性代谢疾病的病因，因此在医药行业中，L-Phe是一些氨基酸输液和

营养剂中的必需成分。除了直接用于合成医药外，还是医药类培养介质的配制中间体及载体，

如抗肿瘤药物的药物载体。在食品行业中，L-Phe可用于配制调味剂，强化营养作用。自从

20世纪80年代以来，由于食品双肽甜味剂阿斯巴甜（Aspartame，简称APM）的开发应用，

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L-Phe作为其合成原料之一，经济价值有了进一步的提高。

2．L-Phe的生产方法

随着市场需求的不断增长，L-Phe的生产受到越来越多的关注。L-Phe主要由化学合成法、

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酶法和微生物发酵法等3种方法来生产。化学合成法因其生产路线长、副产物多、且产物

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为消旋体不宜推广使用。酶法主要是由化学合成的类氨基酸前体经过微生物细胞内酶系高

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效专一地催化合成L-Phe。酶法生产工艺简单、产物浓度较高、纯化步骤简便且生产能力

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较强，是目前工业化生产L-Phe的主要方法之一。Anzawa等利用弗氏柠檬酸杆菌的转氨酶

催化PPA生成L-Phe，当以L-谷氨酸为氨基供体时，反应1h，L-Phe的浓度可达到30g/L，

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反应24h，达到89g/L，转化率为50-80%。徐虹等通过两菌双酶法，耦合E.coliEP8-10中

的转氨酶和E.coliEA-1中的天冬氨酸酶作用，由PPA和富马酸(Fu)生成L-Phe，耦合体系

在EA-1和EP8-10两种细胞质量比为0.4：1，PPA：Fu=1：1.2(mol/mol)时，反应6h可使

0.24mol/L的PPA转化为38.5g/LL-Phe，摩尔转化率达到97%。然而，近年来，由于底物和

酶等主要原料成本高、来源有限，反应过程中酶稳定性差等缺点，酶法生产L-Phe也受到了

很大制约。发酵法是指利用微生物由碳源和氮源大量生产L-