VBNC沙门氏菌的复苏液及其制备方法和复苏方法 .pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN101423808A

(43)申请公布日2009.05.06

(21)申请号CN200810051555.3

(22)申请日2008.12.09

(71)申请人吉林农业大学

地址130118吉林省长春市净月开发区新城大街2888号

(72)发明人李影钱爱东段锐王伟利

(74)专利代理机构长春市四环专利事务所

代理人张铁生

(51)Int.CI

C12N1/20

C12R1/42

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

VBNC沙门氏菌的复苏液及其制备

方法和复苏方法

(57)摘要

本发明公开了一种VBNC沙门氏菌

的复苏液及其制备方法和复苏方法，复苏

液是由血清1份、灭菌纯水1～3份组成，

经混合搅拌混匀，用微孔滤器过滤除菌制

得；将进入VBNC的沙门氏菌置于复苏液

中，在热程控循环仪孔内，采取递增升温

方式，热程控循环仪复苏升温与温育时间

程序选自在5℃到37℃区间，温育时间为

2min～1.5h；然后接种于SS液体培养基，

并在气浴振荡摇床内，200～220r/min培

养；本发明克服现有技术存在的用料多，

取材不便等缺点，本发明仅仅采用一种材

料，利用程序性升温，对处于VBNC近1

年之久的沙门氏菌实现了复苏；不但所用

原料较少，操作简便，而且复苏菌浓度在

12h内就能达到10

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

权利要求说明书

1、VBNC沙门氏菌的复苏液，它是由下列的重量份组成：

血清1份灭菌纯水1～3份。

2、根据权利要求1所述的VBNC沙门氏菌的复苏液，其特征在于，它是由下列的

重量份组成：

血清1份灭菌纯水2份。

3、根据权利要求1所述的VBNC沙门氏菌的复苏液制备方法，该方法包括：

血清和灭菌纯水，混合搅拌混匀，然后用微孔滤器过滤除菌。

4、VBNC沙门氏菌的复苏方法，该方法包括：

(1)将进入VBNC的沙门氏菌，用灭菌生理盐水清洗，6000～8000r/min离心3～

5min，弃上清；

(2)将步骤(1)菌体沉淀物和本发明VBNC沙门氏菌的复苏液混匀，置于热程控循环

仪孔内，采取递增升温方式，热程控循环仪复苏升温与温育时间程序选自在5℃到

37℃区间，温育时间为2min～1.5h；

(3)将菌体沉淀物倒入适于沙门氏菌液体培养基中培养。

5、根据权利要求4所述VBNC沙门氏菌的复苏方法，其特征在于：步骤(3)所述的

培养基为SS液体培养基，并在气浴振荡摇床内，200～220r/min，培养8～48h。

6、根据权利要求4或5所述VBNC沙门氏菌的复苏方法，其特征在于：步骤(2)所

述的热程控循环仪复苏升温与温育时间程序，是从5℃开始直到36℃，每个整数温

度热处理2min，37℃热处理1h。

7、根据权利要求4或5所述VBNC沙门氏菌的复苏方法，其特征在于：所述的热

程控循环仪复苏升温与温育时间程序，为5℃温育20～30min，10℃温育20～

30min，10℃温育20～30min，25℃温育20～30min，37℃温育1～1.5h。

8、根据权利要求4或5所述VBNC沙门氏菌的复苏方法，其特征在于：所述的热

程控循环仪复苏升温与温育时间程序，为15℃温育20～30min，25℃温育1～1.5h，

37℃温育1～1.5h。

9、根据权利要求4或5所述VBNC