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金霉素高产菌株选育及发酵工艺优化

作者：解秀平

来源：《科学与财富》2018年第29期

摘要：金霉素是一种高效广谱抗生素，对多种病原菌有较强的抑制作用，适用于浅表皮

肤感染。发酵效价测定：卡赛帕克C18MGⅡ液相色谱柱（4.6×250mm5？滋m），0.01mol/L

草酸溶液-乙腈-甲醇（10：3∶2），检测波长为360nm，流速为1.0ml/min，柱温为25℃。本

实验对金霉素高产菌株选育并通过不同碳源、不同蛋白胨含量等以发酵效价为指标对金霉素发

酵工艺进行研究。

关键词：金霉素；工艺；研究

金霉素是一种高效广谱抗生素，对多种病原菌有较强的抑制作用，对金葡菌、化脓性链球

菌、肺炎球菌及淋球菌，以及沙眼衣原体等有较好抑制作用。金霉素适用于浅表皮肤感染。

工业微生物育种是建立在遗传和变异的基础上的，没有变异，生物界将失去进化的素材；

没有遗传，变异也无法积累。通过金霉素高产菌株的选育我们可以提高产品的产量和质量。本

实验对金霉素高产菌株选育并通过不同碳源、不同蛋白胨含量等以发酵效价为指标对金霉素发

酵工艺进行研究。

材料和方法1

菌种1.1

金色链霉菌（Streptomycesaureofaciens）。

材料1.2与试剂

葡萄糖（山东西王糖业有限公司）、氯化钠（西安泰华医药科技有限公司）、硫酸铵（西

安泰华医药科技有限公司）、碳酸钙（西安泰华医药科技有限公司）、磷酸氢二钾（西安泰华

医药科技有限公司）、磷酸氢二铵（西安泰华医药科技有限公司）、硫酸镁（成都嘉叶生物科

技有限公司）、琼脂（上海琼泽生物科技有限公司）、麸皮（河南隆霄生物科技有限公司）、

蛋白胨（上海琼泽生物科技有限公司）、酵母粉（上海琼泽生物科技有限公司）、豆油（山东

科兴化工有限责任公司）、玉米淀粉（苏州恒程化工科技有限公司）、小麦粉（河南隆霄生物

科技有限公司）、花生粉（河南隆霄生物科技有限公司）、黄豆粉（河南隆霄生物科技有限公

司）、淀粉酶（上海琼泽生物科技有限公司）、淀粉（西安智诚生物科技有限公司）、糊精

（西安智诚生物科技有限公司）、蔗糖（西安智诚生物科技有限公司）。草酸（上海慈太龙实

业有限公司）、乙腈（上海慈太龙实业有限公司）、甲醇（上海慈太龙实业有限公司）。

仪器1.3

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KQ-300B型10L台式超声波清器（上海楚定分析仪器有限公司）、欧洲Radwag瑞德威电

子天平（深圳市怡华新电子有限公司）、LAB-UPH-10T高端型实验室超纯水机（台上式）

（四川兰博环保设备有限公司）、Temp300双通道热电偶式温计（赛默飞世尔科技水质分析

仪器）、GI-3000-12二元梯度高压液相色谱仪自动进样系统（通用（深圳）仪器有限公司）、

SG-8016A数显水浴恒温振荡器（上海硕光电子科技有限公司）、PHS-3C雷磁pH计（上海楚

柏实验室设备有限公司）、SP-723上海光谱分光光度计（上海光谱仪器有限公司）、HH-6030

超级恒温水槽（常州万科仪器科技有限公司）、高速离心机（北京博劢行仪器有限公司）、实

验室培养箱（北京博劢行仪器有限公司）、卡赛帕克C18MGⅡ液相色谱柱（4.6×250mm5？滋

m）。

培养基及培养条件1.4

1.4.1斜面培养基：磷酸氢二铵：硫酸镁：琼脂：麸皮：磷酸氢二钾（0.015：0.005：2.0：

3.2：0.02）32摄氏度培养4天。

1.4.2发酵培养基：氯化钠：硫酸铵：碳酸钙：蛋白胨：酵母粉：硫酸镁：豆油：玉米淀

粉：花生粉：黄豆粉：淀粉酶（0.2：0.5：0.6：1.4：0.2：0.02：1.25：10：1.5：2.5：

0.004），28摄氏度，转速220r/min培养7天。

1.4.3种子培养基：酵母粉：硫酸镁：磷酸二氢钾：玉米淀粉：黄豆粉；氯化钠：硫酸

铵：碳酸钙：蛋白胨（0.6：0.025：0.03：4.0：2.0：0.2：0.3：0.5：0.5），湿热灭菌二十分

钟，28摄氏度，转速220r/min培养22天。

1.4.4平板培养基

磷酸氢二铵：硫