2025 超高效液相色谱仪（UHPLC）安全操作规程.docxVIP

—PAGEPage1—

—PAGEPage2—

超高效液相色谱仪（UHPLC）安全操作规程

一、引言

超高效液相色谱仪（UHPLC）作为一种高精度、高灵敏度的分析仪器，在实验室的化学、生物、医药等领域的科研与检测工作中具有重要地位。为保障操作人员的人身安全、仪器设备的正常运行以及检测数据的准确性与可靠性，特制定本安全操作规程。本规程适用于所有使用UHPLC的人员，要求操作人员必须严格遵守，确保实验过程安全、高效、有序进行。

二、人员要求

（一）资质与培训

操作人员应具备化学、分析化学、仪器分析等相关专业知识背景，经过专业培训并考核合格后，方可独立操作UHPLC。新入职或初次接触该仪器的人员，需在经验丰富的操作人员指导下进行至少[X]次实际样品的分析操作练习，包括仪器的开关机、样品制备与进样、数据采集与处理等环节，并通过理论知识考核和实际操作考核，确保熟悉仪器的基本原理、操作流程、日常维护及安全注意事项。定期组织操作人员参加安全培训和技术更新培训，培训内容包括但不限于新的检测方法、仪器软件升级后的操作要点、安全事故案例分析及应急处理措施等，培训频率不少于每年[X]次，以不断提升操作人员的专业技能和安全意识。

三、操作前准备

（一）环境检查

UHPLC应放置在清洁、干燥、通风良好且温度和湿度相对稳定的环境中。实验室温度应控制在[具体温度区间]，相对湿度保持在[具体湿度区间]，避免阳光直射和强电磁场干扰，防止环境因素对仪器性能和稳定性产生不利影响。操作区域应配备有效的灭火器材、急救箱、紧急洗眼器和淋浴装置，并确保其处于正常工作状态，以便在发生意外时能够及时进行应急处理。

（二）仪器检查

检查仪器外观是否有损坏、变形、部件松动等异常情况，各连接管路是否牢固、无泄漏，电源插头是否插好且接地良好。开启仪器电源，观察仪器自检过程，检查显示屏、指示灯、操作键盘等部件是否正常工作，仪器自检完成后，查看软件界面是否有错误提示信息，确认仪器的泵压、流速、柱温等关键性能指标是否正常，如有异常应及时通知维修人员进行检修，严禁使用故障仪器进行检测操作，以免造成数据错误或仪器进一步损坏。

四、操作流程

（一）开机

先接通UHPLC的总电源，等待片刻后，依次打开仪器的各个模块电源，包括输液泵、自动进样器、柱温箱、检测器等，启动仪器控制系统。在仪器启动过程中，密切关注仪器的状态指示灯和显示屏信息，确保仪器正常启动。待仪器各模块启动完成并进入待机状态后，打开与之相连的计算机，启动操作软件，进入UHPLC的操作界面，准备进行检测工作。

（二）流动相准备

根据实验要求，选择合适的流动相试剂，并确保试剂的纯度和质量符合要求。使用前，对流动相进行过滤和脱气处理，以去除其中的杂质和气泡，防止堵塞管路和影响检测结果。过滤可使用[具体孔径]的滤膜，脱气可采用超声脱气、真空脱气或在线脱气等方法，确保流动相的稳定性和均匀性。将处理好的流动相倒入仪器的流动相瓶中，并注意标记好试剂名称和浓度，避免混淆。

（三）样品制备

根据检测需求，准确称取适量的样品，使用合适的溶剂进行溶解和稀释，制备成均匀、澄清的样品溶液。样品溶液的浓度应在仪器的检测线性范围内，且无杂质和沉淀。在样品制备过程中，如涉及有毒、有害、易燃、易爆等危险化学品，应严格按照相关化学品的操作规程进行操作，佩戴好防护手套、护目镜、防护面具等个人防护用品，在通风橱内进行样品制备和处理，防止化学品泄漏、挥发对人体造成伤害。

（四）参数设置

在操作软件中，根据样品的性质和检测要求，设置合适的仪器参数，包括流动相流速、柱温、检测波长、进样体积、洗脱程序等。设置参数时，应仔细核对各项参数值，确保其准确无误，避免因参数设置不当导致分离效果不佳、峰形异常或检测结果不准确。同时，应注意参数的合理性，避免设置过高或过低的参数值，以免影响仪器的使用寿命或造成数据异常，参数设置完成后，再次确认无误方可进行下一步操作。

（五）平衡系统

将流动相管路连接好，打开输液泵，设置合适的流速，使流动相通过色谱柱进行平衡。平衡时间应根据色谱柱的类型和规格以及实验要求确定，一般不少于[具体时间]。在平衡过程中，观察柱压和基线的变化情况，确保柱压稳定且基线平稳，无明显波动和噪声，达到稳定状态后方可进行样品分析。

（六）进样分析

将制备好的样品溶液转移至自动进样器的样品瓶中，并将样品瓶放置在进样器的样品架上，确保样品瓶放置正确且无泄漏。在软件界面中设置好样品序列和进样次数等信息，点击“开始进样”按钮，启动进样程序。此时自动进样器将按照设定的顺序和体积吸取样品溶液，并注入色谱柱进行分离分析。在进样过程中，操作人员应密切关注仪器的运行状态和进样进度，避免因外界干扰（如震动、强光照射等）影响进样结果，同时不得随