人感染猪链球菌病样品采集运送与实验室检测方案.pptVIP

感染鼠尾血推片感染兔心脏血推片分离鉴定血平板直接接种新鲜羊血琼脂平板/含8%新生牛血清的营养琼脂平板血或脑脊液等标本直接接种组织标本可直接涂抹平板或剪碎用无菌生理盐水洗涤，洗液接种平板置37℃5%CO2培养箱或者烛缸中培养24小时待检标本置约10倍体积脑心肉汤/含8%新生牛血清葡萄糖肉汤（附配方）/商品化血培养瓶中增菌培养37℃24小时1增菌培养物接种新鲜羊血琼脂平板，置37℃5%CO2培养箱或者烛缸中培养24小时2如果是污染标本,则要接种于选择增菌培养液（含15微克/毫升多粘菌素B，30微克/毫升萘啶酮酸的脑心培养基）进行增菌3增菌培养分离鉴定附：葡萄糖肉汤（含8%新生牛血清）成分：酵母浸膏3克10%葡萄糖溶液20毫升枸椽酸钠3克磷酸氢二钾2克牛肉汤900毫升24.7%硫酸镁20毫升0.5%对氨苯甲酸5毫升新生牛血清80毫升每50毫升无菌肉汤内加入无菌葡萄糖及磷酸镁水溶液各1毫升,混匀.于37℃培养2天证明无细菌生长后存于冰箱内备用。用滤纸过滤并分装于100毫升三角烧瓶内,每瓶50毫升,包扎瓶口,高压灭菌10磅20分钟制法将葡萄糖配成10%水溶液,硫酸镁配成24.7%水溶液,分别高压灭菌8磅15分钟除葡萄糖及硫酸镁外,其他各物混合,加热溶解,矫正pH至7.6,再煮沸5分钟附：葡萄糖肉汤（含8%新生牛血清）浙江省丽水市人感染链球菌病疫情控制和诊疗技术培训会议丽水市CDC兰进权提纲病原学简介样品采集与运送实验室检测病原学简介分类培养特性生化特征致病因子伯杰分类6大类群，29个种16SrRNA序列同源性和化学分类链球菌属分类学定义无芽孢革兰氏阳性细菌，细胞形态为球形或球杆状，直径0.5～2.0微米，细胞成对或成链排列，有些种具有荚膜。……010302链球菌分类链球菌分类根据溶血现象分类甲型溶血性链球菌：称甲型溶血或?溶血，?溶血环中的红细胞并未完全溶解。多为条件致病菌。乙型溶血性链球菌：称乙型溶血或?溶血，?溶血环中的红细胞完全溶解，致病力强丙型链球菌：无溶血环，一般不致病猪链球菌α溶血(偶而也有弱β溶血或α溶血、β溶血现象均不明显)，某些菌株在马血培养基上β溶血兰氏分类：按多糖类抗原（C抗原）将链球菌分成A、B、C、D、E、F、G、H、K、L、M、N、O、P、Q、R、S和T群(其中缺I、J群)，近年又增加U、V群，共20群，每个群有1个或多个种。根据抗原结构的分类01R群的2型猪链球菌S群和D群的1型猪链球菌F群的咽峡炎链球菌L、S、T、U、V群链球菌等几乎所有群的菌株，都能从病猪体内分离得到，引起猪病并偶尔经伤口感染人的链球菌主要有02链球菌分类链球菌分类猪链球菌

血清2型兰氏分类：R群根据菌体荚膜抗原特性不同，分为35个血清型：1/2，1～34型致病性最强的是2型，其次为1型2型猪链球菌1954年英国分离1968年命名为荚膜II型猪链球菌分为致病力不同的株革兰氏阳性无芽胞球菌，兼性厌氧营养要求较高，在普通培养基中生长不良，需补充血液、血清、葡萄糖等在血清肉汤中易形成长链，管底呈絮状沉淀在绵羊鲜血琼脂平板上37℃培养24小时，形成直径l～2毫米的细小菌落，灰白色，半透明，边缘整齐，凸起，光滑，α溶血（有时呈弱β溶血或溶血不明显），48小时后可有草绿色色素沉着。猪链球菌培养特性刚分离的猪链球菌，典型的革兰氏阳性链球菌，链长达二十多个1二代培养后细菌形态不典型，结晶紫作色不良，多为不成链球杆菌，少数呈短链状。2猪链球菌培养特性链球菌.Gramstain.CDC/Dr.RichardFacklam链球菌10℃培养不生长，45℃培养生长，60℃30分钟试验不生长55℃30分钟即可被杀死猪链球菌培养特性猪链球菌生化特性往往差异较大，一般难以作为分类依据触酶试验阴性水解七叶苷、淀粉和精氨酸，不水解马尿酸盐和明胶分解乳糖、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露糖，不分解阿拉伯糖、鼠李糖和甘露醇01020304猪链球菌生化特征致病因子猪链球菌2型主要致病因子溶菌酶释放蛋白（muramidase-releasedprotein,MRP）细胞外因子（extracellularfactor,EF