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小鼠毛囊离体培养操作过程

断脊椎处死小鼠，经处理后剪双侧胡须垫，置于加入清洗液（HBSS与PBS按体积比1:1混

合配制）的培养皿中。

准备工具：

弯镊、眼科镊、剪刀浸泡在75%乙醇中24h，取出备用。

准备3个EP管，装适量的清洗液，分别冲洗三次（每次都使用不同的镊子夹取）

最后一次冲洗，用镊子夹取到装有Williams’E无血清培养基的培养皿中

准备有清洗液的培养皿于显微镜镜头（盛放胡须垫），外科镊顺毛囊方向将毛囊与周围组织

钝性分离，轻轻夹住毛囊底部，小心从皮下组织中倒拔毛囊，然后小心去除毛囊周围的脂肪

组织和毛干周围多余的毛发。拔下的毛囊转移到Williams’E无血清培养基的培养皿中。

取完全部的毛囊后，在洁净台清洗一遍，放培养箱培养24h。

培养24h后，开始加样。加样前准备废液缸、10µL的移液枪和枪头、2个24孔板、两个外

科镊、琼脂（固定作用，使用前加热，使其成液体）。

加入不同浓度的受试物和对照物质，拍照。培养箱中孵育14天，培养基每3天换一次。