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28天重复经口毒性试验方法研究

28天重复经口毒性试验

RepeatedDose28-DayOralToxicityStudy

1范围

本规范规定了啮齿类动物28天重复经口毒性试验的基本原则和方

法。

本规范适用于检测化妆品原料及产品的短期毒性作用。

2规范性引用文件

OECDGuidelinesfortheTestingofChemicals（No.407,Oct.

2008）

食品安全国家标准28天经口毒性试验GB15193.22-2014

3试验目的

通过本试验确定28天经口连续接触化妆品原料或产品引起的毒性

效应，了解其作用靶器官和剂量-反应关系，并估计未观察到有害作用

剂量，初步评价化妆品原料或产品经口的安全性，并为慢性经口毒性

试验的剂量、观察指标、毒性终点的选择提供参考信息。

4定义

未观察到有害作用剂量（NOAEL，No-observedadverseeffect

level）是指通过动物试验，以现有的技术手段和检测指标未观察到任

何与受试物有关的毒性作用的最大剂量。

5试验基本原则

化妆品原料或产品以不同染毒剂量每日经口给予各组实验动物，

每组采用一个染毒剂量，连续染毒28天。染毒期间每日观察动物的毒

性反应，死亡或濒死动物尽可能进行大体解剖、血液生化指标检测及

组织病理学检查。染毒结束后所有存活动物实施安乐死后进行大体解

剖。部分实验动物的组织器官进行组织病理学检查。

6试验方法

6.1剂量设计

至少设定3个受试物剂量组和1个对照组，除不接触受试物外，

对照组的其余处理均与受试物剂量组相同。最高剂量应能引起动物毒

性反应，而不引起动物死亡或严重毒性反应；最低剂量应不出现任何

可观察到的毒性效应，能找出

NOAEL，若有人群接触水平的资料，则最低剂量应高于人群实际

接触水平；中剂量介于高、低剂量之间，可出现轻度的毒性效应，若

设多个中间剂量，则各染毒剂量应引起不同程度的毒性作用。

如果有资料表明，化妆品原料或产品接触水平超过

1000mg/kgBW/d时不会产生可观察到的毒性作用，而且可以根据相

关结构化合物预期其毒性时，可以考虑不必进行三个剂量水平的试验。

6.2受试物制备

当受试物需使用溶媒配制成溶液或混悬液时，溶媒首选水，其次

为植物油（如橄榄油、玉米油等），不溶于水或油的受试物亦可使用

羧甲基纤维素、淀粉等配成混悬液。如果使用其他溶媒时，必须先了

解其毒性特点。

6.3实验动物

6.3.1动物选择

实验动物应符合国家标准相应规定。选择已有资料证明对受试物

敏感的物种和品系，啮齿类动物通常首选年轻的成年大鼠（一般选用

6～8周龄，不超过9周龄），动物初始体重差异应不超过同一性别平

均体重的20%。如果长期毒性试验的剂量设计需要参考该试验的剂量

设计，则两个试验应选用相同种系和来源的实验动物。

每组实验动物至少20只（雌雄各半），如果试验中期计划剖检动

物，则应相应增加每组动物数量。另外，对照组和最高剂量组均应设

定一个卫星组（每组10只，雌雄各半），在染毒结束后继续观察至少

14天，用于了解受试物毒性作用的持续性、可逆性和迟发性。

6.3.2饲养环境

实验动物饲养环境均应符合国家标准相应规定。选用常规饲料，

自由饮水。动物按组别、性别分笼饲养，每笼动物数量应满足动物最

低需要的空间，不影响动物自由活动和观察动物的体征为宜。

6.4试验步骤

染毒开始前，实验动物需适应实验环境至少5d。实验动物随机分

组。受试物可通过灌胃、掺入饲料或饮水进行染毒，具体的方法应当

根据受试物的物理、化学特性及其毒代动力学试验结果而定。每周染

毒7d，连续染毒28天。试验期

间所有动物染毒的方式应完全相同。

6.4.1灌胃

灌胃体积一般不超过10ml/kgBW，且各组染毒体积相同，每日在

大致相同时间段灌胃，每周至少称体重2次，根据体重调整灌胃体积。

如为水溶性的受试物最大灌胃体积可达到20ml/kgBW