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Waters2695HPLC操作规程

一．开机程序

1、首先制备新鲜流动相，清洗液以及样品

A.Alliance对流动相的要求

有机溶剂要求用色谱纯，经0.45m微孔滤膜（有机膜）过滤

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水或缓冲盐溶液要用超纯水（18.2MΩ）当天制备，经0.45m微孔滤膜（水

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膜）过滤

超声波脱气约2分钟

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B.Alliance对清洗液的要求

密封圈清洗液（sealwash）用含5%-10%甲醇的超纯水

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洗针液（needlewash）用较高比例的甲醇/水或乙腈/水

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C.Alliance对样品的要求

按方法要求配制样品溶液，并以过滤或高速离心方式（10000转/分钟以

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上）除去溶液中的固体微粒。

2、打开计算机电源，进入Windows操作系统

3、打开仪器硬件电源（依次打开网络集线器，2695，检测器）

4、进行仪器的Startup操作（Alliance面板操作）

Primesealwash：Diag→Primesealwash，直至入口管没有可见气泡，

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按Halt键停止Prime，再按close关闭界面；

Primeneedlewash：Diag→Primeneedlewash，清洗进样针1-2次。Close

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并Exit，退出Diag界面；

DryPrime：打开泵抽液阀→Menu/Status→DirectFunction→DryPrime→

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依次选择A、B、C、D，同时用注射器抽取液体，结束后按cancel，切记完

成后将抽液阀关闭；

WetPrime：依次将实验所涉及的流路设为100%→DirectFunction→Wet

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Prime，确保流路中为新鲜溶剂；

设定流速、柱温等参数，平衡系统约30分钟；

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Purgeinjection：DirectFunction→Purgeinjection

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5、登录Empower软件，进入运行样品界面

双击Empower3图标，输入用户名和密码。

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默认用户名为system,密码为manager，点击高级“”，选择Quickstart界面，

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选定存放数据文件的项目及系统后进入软件。

6、编制仪器方法，监测基线，准备开始LC分析实验

创建方法组：点击调用方法组编辑器向导“”，创建新的方法组

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平衡监视器：点击平衡系统“/监视基线”图标，在下拉菜单中选择仪器方法

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后，点击平衡“/监视器”。可以点击控制面板“”以观察放大的基线图

7、编辑样品组，采集数据

回到样品队列“”视图，编辑样品组，并保存。点击运行当前样品组方法“”按

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钮以采集样品

8、浏览数据，建立处理方法，处理数据并打印报告

查看数据：点击浏览项目“”，选中样品组，右键查看“相关→通道”，在列表

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中选中样品后双击，可以看到原始图谱

新建处理方法：打开原始图谱后，点击处理参数向导“”，依据向导建立合

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适的积分方法

处理数据：在“通道”中选中待处理样品，右键“处